A. 新冠膠體金法怎麼用
新冠膠體金法,可能指新型冠狀病毒抗原檢測。新型冠狀病毒抗原檢測通常需要根據說明書進行正確的操作。通常需要進行檢測前准備、樣本採集、進行檢測、結果判定和廢棄物處理五個步驟。
1.檢測前准備:仔細閱讀說明書,了解檢測流程及注意事項。查看試劑日期,以及檢查說明書內提到的物品是否有缺失。如試劑過期或物品缺失、破損應及時更換檢測試劑。用清水或者消毒水清洗雙手。
2.樣本採集:用衛生紙擤去鼻涕,取出鼻拭子,避免用手接觸拭子頭,頭部微微後仰,拭子深入1~1.5cm後,貼鼻腔旋轉至少4圈,採集過程至少15秒,讓鼻拭子在鼻腔內充分采樣,隨後使用同一拭子對另一鼻運蠢敬腔重復相同操作。
3.進行檢測:採集完成後,立即將鼻拭子置於采樣管中,拭子頭應在保存液中旋轉混勻至少30秒,同時用手隔著采樣管外壁擠壓拭子頭至少5次,充分混勻,確保樣本充分洗脫於采樣管中。將得到的液體滴入檢測卡樣本孔中檢測,15~20分鍾後,查看結果。
4.結果判定:按照說明書讀出檢測結果。如果C處位置無條帶,說明該新型冠狀病毒抗原檢測可能出現問題,無論T處是否有條帶出現,均屬於無效結果。如果C處有清晰檔改條帶,但是T處無條帶,一般說明與對照相比,樣本中無對應抗原,而未發生反應,呈現新型冠狀病毒抗原檢測陰性結果。如果C處有清晰條帶,如果T處有深色或淺色條帶,通常說明該新型冠狀病毒抗原檢測結果為陽性,已發生抗原抗體結合反應,多提示機體可能存在新型冠狀病毒感染的可能。
5.廢棄物處理:所有使用後的檢測卡、拭子、采樣管等應該裝入密封袋按照醫療廢物處理。
新型冠狀病毒抗體弱陽性一般是感染新型冠狀病毒引起的,出現旁慎這種檢測結果的原因可能是病毒潛伏期、檢測試劑敏感度不高等,由於患者體內存在新型冠狀病毒,新型冠狀病毒具有一定的傳染性,所以新型冠狀病毒抗體弱陽性也具有一定的傳染性,患者仍然需要居家隔離,如果沒有明顯的臨床症狀,可以通過調整飲食、適當運動增強體質,能夠促進弱陽性轉為陰性。
B. 膠體金試紙條的測試原理是什麼
膠體金快速檢測卡是採用膠體金免疫層析技術研製而成的,此技術是90年代初在免疫滲透技術的基礎上建立的一種快捷簡單的免疫學檢測技術,市場上一般用到的有雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、小分子競爭法等等。 膠體金是氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,金離子還原後聚合成的一定大...小的金顆粒,它由一個基礎的晶核(11個金原子形成的二十面體)和包圍在外的雙離子層構成(內層為負離子層AuCl2-,外層是帶正電荷的H+)。由於靜電作用,金顆粒之間相互排斥而懸浮成為一種穩定的膠體狀態,形成帶負電的疏水膠溶液,故稱膠體金。 。質量差的溶液燒制後,液面有漂浮物,大小不一,形狀各異。膠體金顆粒大小,決定了我們用肉眼觀察到的膠體金溶液顏色,由紅到紫色。 膠體金一般在弱鹼環境下帶負電荷,會與蛋白質分子的正電荷基團形成牢固的結合,一般稱這種結合叫靜電結合,所以不影響蛋白質的生物特性。除了與蛋白質結合以外,它還可以與許多其它生物大分子結合,如SPA、PHA、ConA等。根據膠體金的一些物理性狀,如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應,加上結合物的免疫和生物學特性,從而使膠體金廣泛地應用於免疫學、組織學、病理學和細胞生物學等領域。 膠體金標記技術,實質上是蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。用於膠體金標記的蛋白必須要經過前處理,其目的在於 1、去除高濃度的鹽分,高濃度的鹽分往往干擾蛋白與膠體金的吸附結合,或導致膠體金粒子的凝聚,這一步往往採用低濃度緩沖液來進行。 2、使蛋白分子盡量分散為單體,凍干蛋白或高濃度蛋白溶液中蛋白分子往往凝聚為多聚體大分子,可同時與多個膠體金粒子結合,影響標記的靈敏度和定量分析。 3、使蛋白具有適當的分子量。蛋白分子量過小(30 kD),形成的蛋白復合體往往是不穩定,可短時間內失活。而分子量過大時,被認為影響探針的靈敏度,特別是已知蛋白的結構與活性中心的情況下,去除對活性影響的結構部分是提高標記靈敏度,延長探針壽命(防止凝集)的有效辦法。把分子量過小的蛋白與其它蛋白(如牛血清蛋白等)結合後,能制備出穩定性更強的探針。 當蛋白前處理完成後,接著要確定膠體金與蛋白結合的最佳pH值。對於理化性質不確定的蛋白這一步尤為重要。過量的蛋白與不同pH值的膠體金結合後,只有某一特定pH值能夠形成結合最穩定的探針。在高濃度電解質(如NaCl)作用下不會凝聚。不同蛋白的適宜pH范圍的寬窄大不相同。一般選擇最小適宜pH值為最佳pH值。但有些探針的實際情況並不完全如此,最穩定的探針並不完全代表活性最好,這要靠實驗驗證。 在確定最佳pH值後,最後要確定最小蛋白量,即能夠形成穩定探針的蛋白的最小量。如果在制備探針時加入太多的蛋白,不僅造成浪費,而且更為嚴重的是容易造成探針凝聚,並嚴重影響標記活性。因為探針溶液中的游離蛋白容易搶先與標記位點結合,起到「封閉」(Blocking)作用,而膠體金探針標記不上。在標記位點希少、被標記物含量較少的情況下要特別注意。 膠體金具有很高的動力學穩定性,在穩定因素不受破壞時自身凝聚極慢,可放置數年不發生凝聚。影響穩定的因素主要有電解質、溶膠濃度、溫度、非電解質等。金溶膠必須有少量電解質作穩定劑,但濃度不宜過高。高濃度親水性非電解質能剝去膠粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物質促使溶膠凝聚,但一定量的高分子物質反而可增加溶膠穩定性,如蛋白質、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的穩定效果。. 當金溶膠吸附蛋白質後,溶膠的穩定性隨溶液pH而變化,而這種變化又取決於吸附蛋白質的等電點,如ConA,過氧化物酶等,當pH較低時保持穩定,提高pH則顯得不穩定,接近等電點或略高時又變得穩定了。標記後的膠體金溶液可用0.2~0.5mg/ml PEG20000 作為穩定劑。在4~10℃貯存數月有效,不宜冰凍。貯存中可能會發生程度不同的凝聚,可離心除去。 當今國內有很多膠體金試紙條生產廠商,江浙這一帶尤為突出,推薦廠家:蘇州快捷康生物技術有限公司。
C. 艾滋病試紙的膠體金法
膠體金法(金標)人類免疫缺陷病毒(HIV 1/2)抗體檢測試劑盒是應用膠體金免疫層析技術製成的集靈敏性、特異性及操作簡便的一步法HIV 1/2抗體定性檢測試劑。用於定性檢測人血清或血漿樣本中的HIV 1型和HIV 2型的特異性抗體,以輔助診斷HIV感染,其陽性結果需用免疫印跡法確認。
其檢測原理是用HIV重組抗原和羊抗鼠IgG分別固定於硝酸纖維素膜,並和包被有膠體金標記的HIV重組抗原及鼠IgG的玻璃纖維紙片及其他試劑組成。應用膠體金免疫層析技術,採用雙抗原夾心的原理檢測人類血清及血漿樣本中的HIV 1/2抗體。
D. 膠體金檢測方法
膠體金檢測方法如下:
膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,並由於靜電作用成為一賀孝種穩定的膠體狀態,形成帶負電的疏水膠溶液,由於靜電作用而成為穩定的膠體狀態,故稱膠體金。
在檢測時,如樣本中沒有嗎啡或其代謝產物存在,膠體金標記的特異性抗體與膜區抗原結合形成兩條紅線(一條反應線T,一條質控線C),表明檢測結果為陰性;
如樣本中存在嗎啡或其代謝產物,而且濃度高於檢測水平(300ng/ml)時,毒品分子就與膠體金標記的抗體競爭結合,從而阻止膠體金標記的抗體與膜區抗原結合,使其對應的紅色反應線消失,僅出現一條紅色的質控線,表明檢測結果為陽性。
E. 什麼是膠體金法為什麼叫膠體金法
膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,並由於靜電作用成為一種穩定的膠體狀態,形成帶負電的疏水膠溶液,由於靜電作用而成為穩定的膠體狀態,故稱膠體金。膠體金在弱鹼環境下帶負電荷,可與蛋白質分子的正電荷基團形成牢固的結合,由於這種結合是靜電結合,所以不影響蛋白質的生物特性。 膠體金除了與蛋白質結合以外,還可以與許多其它生物大分子結合,如SPA、PHA、ConA等。 由於膠體金具備這個特性,所以常用來檢測,所以成為了一種檢測方法,用膠體金法命名。比如 嗎啡檢測試紙(膠體金法)的原理:本品採用膠體金免疫層析技術,將嗎啡抗原包被在硝酸纖維薄膜上,在玻璃纖維上包被膠體金標記的特異性抗體。在檢測時,如樣本中沒有嗎啡或其代謝產物存在,膠體金標記的特異性抗體與膜區抗原結合形成兩條紅線(一條反應線T,一條質控線C),表明檢測結果為陰性;如樣本中存在嗎啡或其代謝產物,而且濃度高於檢測水平(300ng/ml)時,毒品分子就與膠體金標記的抗體競爭結合,從而阻止膠體金標記的抗體與膜區抗原結合,使其對應的紅色反應線消失,僅出現一條紅色的質控線,表明檢測結果為陽性。
F. 膠體金法的制備方法
用容跡灶量瓶量取200ml超純水加入到 500ml錐形瓶中,將錐形瓶置於磁力加熱攪拌器加熱板上,放入磁力攪拌子,打開攪拌旋鈕至適當速度。用兄州搭移液器吸取2ml 1%氯金酸溶液於上述 200ml超純水中,攪拌1min,關閉攪拌旋鈕,打開加熱旋鈕,加熱至沸騰。打開攪拌旋鈕至適當速度,快速加入經微孔濾膜羨拿過濾。1% 檸檬酸三鈉溶液0.8ml,溶液在2分鍾內由灰色變黑色最後變為紅色,再繼續加熱攪拌 10分鍾。關掉加熱旋鈕,適當速度攪拌至室溫,定容至200ml,4~C保存。
G. 膠體金法怎麼用
膠體金與標記蛋白簡介
在不同還原劑的作用下,由氯金酸(HAuCL4)可以制備出金顆粒直徑在0.8-500nm的膠體金。制備好的膠體金保存時間較長,可在4℃保存6個月以上,或在室溫下可保存1-2個月。
膠體金在做為標記探針時,不同用途選用的膠體金的直徑范圍也不同,用於免疫快速檢測的膠體金顆粒直徑范圍一般在3-40nm間。
膠體金粒子表面為一層AuC12—,粒子表面帶有負電荷金顆粒表麵包被一層生物大分子(如蛋白)可以穩定和保護金顆粒,維持膠體的穩定,可防止外來電解質的影響使粒子相互凝聚。
膠體金粒子對蛋白的吸附作用取決於溶液的pH值,這是因為蛋白中氨基酸的凈電荷取決於溶液的pH值,在pH=pI時蛋白溶液呈中性。在pH=pI時蛋白溶解度最小,水化程度最小,更容易吸附到疏水的金粒子表面。但在實際的膠體金探針制備中,一般膠體金調整為pH=pI+0.5,這樣更有利於結合更穩定。
膠體金探針所用的蛋白通過三種機制於吸附於金顆粒的表面:一、金粒子所帶負電荷與蛋白部分鹼性氨基酸(如賴氨酸,精氨酸,pH均大於10)所帶陽性電荷的最初的相互吸引;二、蛋白通過某些疏水性氨基酸殘基(包括色氨酸)與金粒子表面之間的疏水吸附作用;三、蛋白中的半胱氨酸或甲硫氨酸的硫基與金粒子間的電子對的共用以共價鍵結合。
用於制備膠體金探針的蛋白需要進行前處理後才能與金顆粒更好的結合。未經處理的蛋白質一般來說均含有較高濃度的鹽分,而高濃度的鹽分往往干擾蛋白與膠體金的吸附結合,或導致膠體金粒子的凝聚,所以首先要去除蛋白質溶液中的鹽分。凍干蛋白或高濃度蛋白溶液中蛋白分子常凝聚為多聚大分子,可同時與多個膠體金粒子結合,影響探針的靈敏度,分散蛋白分子為單體也是蛋白前處理的重要一項。處理標記的使其蛋白具有適當的分子量,如果蛋白分子量過小(30kD),形成的蛋白復合體往往是不穩定。把分子量過小的蛋白與其它蛋白(如BSA,牛血清蛋白等)結合後,能制備出穩定性更佳的探針。分子量過大時,影響探針的靈敏度,在已知蛋白的結構與活性中心的前提下,去除對活性無影響的結構部分可提高標記的靈敏度。
二、免疫膠體金產品原理及應用
膠體金探針大多用單克隆抗體標記,應用免疫層析法製成快速診斷產品,具有較高的特異性,而且相對穩定性很高。檢測一般在5-10min就可以讀出結果,相比其它方法(如ELISA需1-2h,PCR需要時間更長)大大的縮短了檢測時間。檢測樣(可以是組織液、血清、尿液、糞便等)只需做非常簡單的處理或不做前處理即可進行檢測。結果以顏色的變化讀取,不需要特別儀器設備。
免疫膠體金法快速檢測試紙利用層析原理、雙抗體夾心法或免疫競爭法或間接法,應用被檢測物質的特異性和能與其發生特異反應的抗原或抗體,並以金顆粒為顯色劑達到快速檢測目的。
使用快速檢測產品時,在卡的加樣孔加入待測樣,利用層析原理不斷的向另一端層析,隨著層析的進行,樣本中的待測成分固定於測試線(T線)並以顏色變化顯示,並以對照線(即控制線,C線)確保檢測的有效性。
H. 膠體金法測懷孕怎麼用
現在測試懷孕的方法都是多種多樣的,而且都是屬於那種五花八門的測試的方法,現在比較常見的是一種叫做膠體金法的方法,很多人都已經用這種方法來測試懷孕,但是,其實具體的使用方法還是有很多的人都不知道到底是什麼,所以,膠體金法測懷孕怎麼用?
1、 膠體金法就是我們在早孕試紙包裝上經常看到的「HCG」,膠體金是由氯金酸在某些還原劑的作用下,聚合成的一定大小的金色顆粒,這種金色顆粒會由於靜電的作用成為一種穩定的膠著狀態,並且形成帶負電的疏水溶液,故而稱為膠體金還是比較形象的。
2、 能是氯金酸變成膠體金的還原劑主要有白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等物質,膠體金法測早孕的主要原理就是由於孕婦的尿液中含有大量的一種人絨毛膜促性腺激素,這是一種糖蛋白質類激素,而沒有懷孕的婦女體內基本上沒有HCG,膠體金發就是以膠體金為指示標記,通過測尿液中HCG濃度來判斷是否有孕。
3、 早孕試紙顧名思義就是能在胎兒發育很早的時候就能夠檢測出孕婦已經懷孕,這個時間一般最短一周,如今這種試紙有很多種,有的測出時間比較早,並且比較准確,有的相對比較低端的,可能就不能很早的檢測出懷孕,膠體金法早孕試紙還分為卡式和筆試。
正常情況下懷孕後2周以上才可以測試出來的,也就是排卵期性生活後2周以上測試結果才比較准確,血hcg測試這個的速度要快些,一般來說這個性生活後一周以上就可以測試出來了。
建議換一個,掉水裡算已經使用了。沒有重復使用功能。驗孕棒是體外診斷(IVD)產品的一種,所謂測試即是利用驗孕棒檢測尿液中的人絨毛膜促性腺激素簡稱HCG。HCG是由懷孕女性的胎盤分泌的一種促激素,隨血液分布於全身,從而作用於靶器官,尿液中亦存在一定濃度的HCG。目前市場上的絕大部分驗孕產品都是採用膠體金法,根據雙抗體夾心原理對尿液中的HCG進行定性或半定量檢測,從而確定是否懷孕。值得注意的是,此類驗孕產品並非100%准確,某些疾病也可能導致體內HCG濃度升高,從而造成假陽性結果。
雖然驗孕棒可以測出來是否懷孕,但還是想給各位需要驗孕的女性朋友們幾點小建議來提高用驗孕棒驗孕的准確性。首先盡量採用早晨的第一次尿液進行檢測,因為這個時候的激素水平最容易檢測出來。不要為了增加尿液而喝過多的水分,因為這會稀釋了激素的水平。一些葯物可能會影響到測試的結果,所以一定要仔細閱讀標簽說明。