凝膠點測定的方法與步驟

① 凝膠時間

漿液凝膠時間是指在一定的溫度條件下，漿液從混合（或製成）至不可流動時梁尺所經歷的時間。凝膠時間是漿液可控性的主要指標之一，在注漿堵水施工中埋渣脊，漿液的凝膠時間指標尤其重要，若施工中採用的注漿材料凝膠時間過長，則極易受到地下水的稀釋影響，從而造成注漿浪費，甚至造成注漿失敗。漿液凝膠時間採用符號T_g表示。

漿液的凝膠時間測定方法主要有黏度計法和倒杯法。

黏度計法是採用旋轉黏度計對注漿材料進行黏度測試。漿液的初期黏度較低，一旦漿液凝膠時，漿液黏度急劇增大，此時所經歷的時間稱為漿液凝膠時間。一般而言，當漿液的黏度達到100 cp時，漿液已基本失去流動性彎滲，因此，可將此時所經歷的時間作為漿液凝膠時間。黏度計法適用於凝膠時間大於3min的注漿材料。

倒杯法是一種比較簡單的方法，該方法是：首先用量筒量取A液（主液）與B 液（固化液），分別置於燒杯中，然後將A液倒入裝有B液的燒杯中，立即把A、B混合液再倒入A液的燒杯中，重復交替混合液，直到漿液不再流動時或漿液呈現黏稠狀為止，期間所經歷的時間為漿液的凝膠時間。

② RNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和步驟

一、實驗目的

掌握植物總RNA非變性膠電泳的原理和方法。

二、實驗原理

RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠，不同的RNA條帶也能分開，但無法判斷其分子量。只有在完全變性的條件下，RNA的泳動率才與分子量的對數呈線性關系。因此要測定RNA分子量時，一定要用變性凝膠。在需快速檢測所提總RNA樣品完整性時，配製普通的1% 瓊脂 糖凝膠即可。

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三、實驗材料、器具及葯品

蘑菇的總RNA溶液。 電泳儀，電泳槽，電子 天平 ， 移液器 ，槍頭，微波爐，紫外透射檢測儀等。 瓊脂糖，1XTAE電泳緩沖液，0.5μg/ml溴化乙錠（EB）10X載樣緩沖液。

四、實驗步驟

（1）用1×TAE電泳緩沖液製作瓊脂糖凝膠，加1×TAE電泳緩沖液至液面覆蓋凝膠。

（2）在超凈工作台上，用移液器吸取總RNA樣品4μl於封口膜上。在 實驗台 上再加入5μl 1×TAE電泳緩沖液及1μl 的10X載樣緩沖液，混勻後，小心加入點樣孔。

（3）打開電源開關，調節電壓至100V，使RNA由負極向正極電泳，約30min後將凝膠放入EB染液中染色5min,用清水稍微漂洗。在紫外透射檢測儀上觀察RNA電泳結果。

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RNA的變性瓊脂糖凝膠檢測

試劑 ：

（1）MOPS緩沖液（10*）:0.4mol/L 嗎啉代丙烷磺酸（MOPS） (Ph7.0)，0.1mol/L NaAc, 10mol/L EDTA 。

（2）上樣染料：50%甘油，1mmol/L EDTA ,0.4%溴酚藍，0.4%二甲苯藍。

（3）甲醛。

（4）去離子甲醯胺。v電泳槽清洗：去污劑洗干凈（一般浸泡過夜）——水沖洗——乙醇 乾燥 ——3%H2O2灌滿——室溫放置10分鍾——0.1%DEPC水沖洗。

操作：

（1） 將制膠用具用70%乙醇沖冼一遍，晾乾備用。

（2） 配製瓊脂糖凝膠。

①稱取0.5g瓊脂糖，置干凈的100ml 錐形瓶中，加入40ml蒸餾水，微波爐內 加熱 使瓊脂糖徹底溶化均勻。

②待膠涼至60--70 ℃，依次向其中加入9ml 甲醛、5ml 10X MOPS緩沖液和0.5ul 溴化乙錠，混合均勻。

③灌制瓊脂糖凝膠。

（3） 樣品准備：

① 取 DEPC處理過的500ul小離心管，依次加入如下試劑： 10x MOPS緩沖液2ul，甲醛3.5ul,甲醯胺（去離子）10ul，RNA 樣品 4.5ul,混勻。

② 將離心管置於60℃水浴中保10分鍾，再置冰上2分鍾。

③ 向管中加入3ul 上樣染料，混勻。

（4）上樣。

（5）電泳：電泳槽內加入1XMOPS緩沖液，於7.5V/ml 的電壓下電泳。

（6）電泳結束後，在紫外燈下檢查結果。

③ DNA酶切及凝膠電泳的操作步驟

1、 將清潔乾燥並經滅菌的eppendorf管(最好0.5ml)編號,用微量移液槍分別加入DNA 1μg和相應的限制性內切酶反應10×緩沖液2μl,再加入重蒸水使總體積為19μl,將管內溶液混勻後加入1μl酶液,用手指輕彈管壁使溶液混勻,也可用微量離心機甩一下,使溶液集中在管底。此步操作是整個實驗成敗的關鍵,要防止錯加，漏加。使用限制性內切酶時應盡量減少其離開冰箱的時間，以免活性降低。
2、 混勻反應體系後,將eppendorf管置於適當的支持物上（如插在泡沫塑料板上）,37℃水浴保溫2-3小時,使酶切反應完全。
3、 每管加入2μl 0.1mol/L EDTA(pH8.0),混勻,以停止反應,置於冰箱中保存備用。 1、 取5×TBE緩沖液20ml加水至200ml,配製成0.5×TBE稀釋緩沖液,待用。
2、 膠液的制備：稱取0.4g瓊脂糖,置於200ml錐形瓶中,加入50ml 0.5×TBE稀釋緩沖液,放入微波爐里(或電爐上)加熱至瓊脂糖全部熔化,取出搖勻,此為0.8%瓊脂糖凝膠液。加熱過程中要不時搖動,使附於瓶壁上的瓊脂糖顆粒進入溶液。加熱時應蓋上封口膜,以減少水份蒸發。
3、 膠板的制備：將有機玻璃膠槽兩端分別用橡皮膏(寬約1cm)緊密封住。將封好的膠槽置於水平支持物上,插上樣品梳子,注意觀察梳子齒下緣應與膠槽底面保持1mm左右的間隙。
向冷卻至50-60℃的瓊脂糖膠液中加入溴化乙錠(EB)溶液使其終濃度為0.5μg /ml(也可不把EB加入凝膠中,而是碰正陵電泳後再用0.5μg/ml的EB溶液浸泡染色)。用移液器吸取少量融化的瓊脂糖凝膠封橡皮清鋒膏內側,待瓊脂糖溶液凝固後將剩餘的瓊脂糖小心地倒入膠槽內,使膠液形成均勻的膠層。倒膠時的溫度不可太低,否則凝固不均勻,速度也不可太快,否則容易出現氣泡。待膠完全凝固後撥出梳子,注意不要損傷梳底部的凝膠,然後向槽內加入0.5×TBE稀釋緩沖液至液面恰好沒過膠板上表面。因邊緣效應樣品槽附近會有一些隆起,阻礙緩沖液進入樣品槽中,所以要注意保證樣品槽中應注滿緩沖液。
4、 加樣：取10μl酶解液與2μl 6×載樣液混勻,用微量移液槍小心加入樣品槽中。若DNA含量偏低,則可依上述比例增加上樣量,但總體積不可超過樣品槽容量。每加完一個樣品要更換tip頭,以防止互相污染,注意上樣時要小心操作,避免損壞凝膠或將樣品槽底部凝膠刺穿。
5、 電泳：加完樣後,合上電泳槽蓋,立即接通電源。控制電壓保持在60-80V,電流在40mA以上。當溴酚藍條帶移動到距凝膠前沿約2cm時,停止電泳。
6、 染色：未加EB的膠板在電泳完畢後移入0.5μg/ml的EB溶液中,室溫下染色20-25分鍾。
7、 觀察和拍照：在波長為254nm的長波長紫外燈下觀察染色後的或已加有EB的電泳膠板。DNA存在處顯示出肉眼可辨的桔紅色熒光條帶。紫光燈下觀察時應戴上防護眼鏡或有機玻璃面罩,以免損傷眼睛。 經照相機鏡頭加上近攝鏡片和紅色濾光片後將相機固定於照相架上，採用全色膠片，光圈5.6,曝光時間10-120秒(根據熒光條帶的深淺選擇)。
8、 DNA分子量標准曲線的製作：在放大的電泳照片上,以樣品槽為起點,用卡尺測量λDNA的EcoRⅠ和HindⅢ酶切片段的遷移距離,以厘米為單位。以核苷酸數的常用對數為縱坐標,以遷移距離為橫坐標,在坐標紙上繪出連結各點的平滑曲線,即為該電泳條件下DNA分子量的標准曲線。
9、 DNA酶切片段大小的測定：在放大的電泳照片上笑戚,用卡尺量出DNA樣品各片段的遷移距離,根據此數值,在DNA分子量標准曲線上查出相應的對數值,進一步計算出各片段的分子量大小(若用單對數坐標紙來繪制標准曲線,則可根據遷移距離直接查出DNA片段的大小)。反之,若已知DNA片段的大小亦可由標准曲線上查出它預計的遷移距離。
10、 DNA酶切片段排列順序的確定：根據單酶切,雙酶切和多酶切的電泳分析結果,對照DNA酶切片段大小的數據進行邏輯推理,然後確定各酶切片段的排列順序和各酶切位點的相對位置。以環狀圖或直線圖表示,即成該DNA分子的限制性內切酶圖譜。
[注意]
1.酶切時所加的DNA溶液體積不能太大，否則DNA溶液中其他成分會干擾酶反應。
2、酶活力通常用酶單位（U）表示，酶單位的定義是：在最適反應條件下，1小時完全降解1mg lDNA的酶量為一個單位，但是許多實驗制備的DNA不象lDNA那樣易於降解，需適當增加酶的使用量。反應液中加入過量的酶是不合適的，除考慮成本外，酶液中的微量雜質可能幹擾隨後的反應。
3、市場銷售的酶一般濃度很大，為節約起見，使用時可事先用酶反應緩沖液（1×）進行稀釋。另外，酶通常保存在50%的甘油中，實驗中，應將反應液中甘油濃度控制在1/10之下，否則，酶活性將受影響。
4、 觀察DNA離不開紫外透射儀,可是紫外光對DNA分子有切割作用。從膠上回收DNA時,應盡量縮短光照時間並採用長波長紫外燈(300-360nm）,以減少紫外光切割DNA。
5、 EB是強誘變劑並有中等毒性,配製和使用時都應戴手套,並且不要把EB灑到桌面或地面上。凡是沾污了EB的容器或物品必須經專門處理後才能清洗或丟棄。
6、 當EB太多,膠染色過深,DNA帶看不清時,可將膠放入蒸餾水沖泡,30分鍾後再觀察。

④ 凝膠保濕性測試方法

凝膠保濕性是指凝膠在皮膚表面形成一層水分保護屏障，使水分得以保留在皮膚上的能力。測定凝膠念稿保濕性可採用一些標准化的方法，例如通過測定皮膚水分蒸發率、皮膚膨脹力、凝膠吸水率等指標來評估凝膠的保濕能力。

以下是一畢團種簡單的凝膠保濕性測試方法，供參考：

1. 將一定量的凝膠樣品均勻地塗抹在手背或前臂的一部分皮膚上。

2. 使用電子秤仔數孝對皮膚及塗有凝膠樣品的部位分別稱重。

3. 記錄時間並等待5分鍾，使凝膠充分吸收皮膚中的水分。

4. 在5分鍾後，分別稱重皮膚及塗有凝膠樣品的部位。此時，如果凝膠具有保濕性，則塗有凝膠的部位的重量將大於不塗凝膠的部位的重量。

5. 根據稱重結果計算凝膠的保濕性能指數。

⑤ 求大神告知，怎麼測酚醛樹脂的凝膠點

可以採用飛秒檢測的熱分析方法去進行，只需要幾個毫克就可以測定出來，當然還有一種需要量的比熱法等

⑥ 凝膠劑沉降比怎麼測

凝膠劑沉降比測定步驟如下：
1、准備一個直徑大約為6毫米，高約12毫米的透明量筒，以迅仿及待測的凝膠劑。
2、在透明量筒中注入一定量的待測液體（如水、頌昌歲礦泉水等），並記錄液體高度h1。
3、將一定量的凝膠劑緩慢地倒入透野睜明量筒中，使其均勻地分布在液體表面上，然後輕輕振動透明量筒，將空氣排除。
4、記錄凝膠劑開始沉降時的初始高度h2，並開始計時。
5、每隔一段時間（如30分鍾、1小時等），觀察透明量筒中液體和凝膠劑的高度變化，並記錄下來。
6、當凝膠劑完全沉降後，停止計時，記錄下凝膠劑沉降後上層液體的高度h3。
7、計算凝膠劑的沉降比：沉降比=（h2-h3）/h1，其中h2為凝膠劑開始沉降時的高度，h3為凝膠劑完全沉降後上層液體的高度，h1為液體注入量筒時的高度。

⑦ 導光凝膠的黏度檢驗方法是什麼

導光凝膠的黏度檢驗方法主要分為兩種：旋轉黏度法和移液黏度法。
1. 旋轉黏度法段瞎笑
旋轉黏度法是通過旋轉式黏度計來測定導光凝膠的黏度。該方法將樣品加入旋轉式黏度計的測量室中，然後旋轉黏度計，測量樣品與旋轉器之間的扭矩隨轉速的神吵變化情況。根據扭矩和轉速的比例關系，可以計算出樣品的黏度。
2. 移液黏度法
移液黏度法是通過移液式黏度計來測定導光凝膠的黏度。該方法將樣品加入移液式黏度計的玻璃管中，然後通過重力或壓力將樣品從一定高度或壓力下流出，測量樣品流動的時間或速度，從而計算出樣品的黏度。
需要注意的是，不同的導光凝膠可能具有不同的黏度特性，握含因此在進行黏度檢驗時，需要根據具體的樣品特性選擇合適的黏度檢驗方法。此外，黏度檢驗還需要進行標准化，以確保測試結果的准確性和可比性。

⑧ 瓊脂怎麼測定凝膠強度

凝膠強度低於1000的都屬於石花菜瓊脂粉，95度水泡一泡就能融化，凝膠強度高於1000的是江蘺菜瓊脂粉，需要開水煮沸才能完全融化。冊念石花菜的彈性好，凝固點低，江蘺菜的硬度好。石花菜的用量大，江蘺菜的用量小，水粉比例400比1就能做出果凍狀，42度凝固。你比照這些特性進行比例小試。青島瓊埋模脂製造有限公司州液困回答。

⑨ 氫氧化鋁凝膠測定方法

方法如下：
1、取氫氧化鋁凝膠5ml，加稀鹽酸10ml，加熱知宴溶解後，顯鋁鹽的鑒別反應。
2、取氫氧化鋁凝膠約8g，精密稱定，照氫氧枝叢化鋁含量測定項下的猛猛櫻方法自加鹽酸與水各10ml，加熱溶解後起反應。