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測量分子量的方法

發布時間:2022-01-22 09:17:35

1. 【求助】 分子量的測定方法有哪些

最簡單的粘度法,不過需要查到α,K等相關的參數。 可以試一試GPC(SEC),可得到數均、質均分子量及分子量分布male7151(站內聯系TA)高聚物分子量的測定一般有下面幾種方法:端基分析沸點升高和冰點降低膜滲透壓光散射(絕對) 小角激光光散射(LALLS)(絕對) 超速離心沉降(絕對)粘度凝膠色譜(如與光散射連用則絕對)sui422(站內聯系TA)我也在找這個方面的內容,苦於沒有人能給我指條明路hyw.2006(站內聯系TA)做個GPC嘛!皇甫功凱(站內聯系TA)高吸收性樹脂(SAP)也可以用GPC測分子量分布嗎?yingram(站內聯系TA)PI?溶解性好的話可以做GPC,不過 肯定是相對的啊,再說GPC的標樣一般都 是PS,所以也是做個參考吧提豐之災(站內聯系TA)三樓的兄弟厲害! 我就補充一點,有點班門弄斧了 還有核磁共振(NMR)也可以測量分子量 三樓的兄弟厲害! 我就補充一點,有點班門弄斧了 還有核磁共振(NMR)也可以測量分子量 可以說的具體點么

2. 測定聚合物平均分子量的方法有哪些得到的是何種統計平均分子量

分子量和分子量分布的統計計算如圖 分子量和分子量分布的測定方法 測定分子量的方法很多,包括端基分析法、沸點升高和冰點降低、膜滲透壓和光散射等方法,由於測定方法的不同,分子量的含義也不同,因而具有各種不同的數值。

3. 測定相對分子質量的方法有哪些

1,
端基分析法
。通過
化學分析
的方法測特定的端基含量從而推導出分子量,前提是必須對
高分子結構
有充分的了解,它還可以用於
支鏈
數目的測定。使用這種方法分子量不一般不能太大。
2,沸點升高和冰點降低。這是利用
稀溶液

依數性
測定溶質分子量的方法,是經典的
物理化學方法
。溶劑中加入不揮發性的溶質後,溶液的
蒸氣壓
下降,導致溶液的沸點比純溶劑的高,溶液的冰點比溶劑的低。這種方法沒用過,對溫差的
測量精度
要求很高。
3,膜
滲透壓
。用
半透膜
通過滲透壓測定的方法,也應該是一種物理化學方法。
4,氣相滲透法(VPO)。利用純溶劑與加入溶質的溶液
飽和蒸氣壓
不同來測定分子量。測出的是數均分子量。
5,光散射/
小角
激光光散射
(LALLS)。這兩個方法只是儀器,數據處理和所用光源等方面有差異,原理差不多的。這種方法比較常用,而且儀器現在也發展到了一定水平,是測試高分子絕對分子量最有效的方法。
6,
超速離心
沉降。很復雜,最先用於蛋白質分子的測量。是一種相對方法。
7,
凝膠色譜法
(GPC)。很常用,根據不同大小的分子在介質中的停留時間不同來測量分子量。是一種相對方法,須結合其它方法的配合。
8,粘度法。利用玻璃
粘度計
(烏式粘度計,奧式粘度計)增比粘度,然後外推
特性粘數
,根據Mark-Houwink方程算出分子量,是最經濟的方法吧,而且重新度很好。
水溶性高分子
一般都用這種方法測量分子量,也是一種相對方法。

4. 測量有機小分子物質的分子量有哪些方法啊

柱層析,或氣相色譜、液相色譜測小分子物質分子量挺好的,也很准確。

5. 高分子測分子量的方法都有哪些以及優缺點

1,端基分析法。通過化學分析的方法測特定的端基含量從而推導出分子量,前提是必須對高分子結構有充分的了解,它還可以用於支鏈數目的測定。使用這種方法分子量不一般不能太大。
2,沸點升高和冰點降低。這是利用稀溶液的依數性測定溶質分子量的方法,是經典的物理化學方法。溶劑中加入不揮發性的溶質後,溶液的蒸氣壓下降,導致溶液的沸點比純溶劑的高,溶液的冰點比溶劑的低。這種方法沒用過,對溫差的測量精度要求很高。
3,膜滲透壓。用半透膜通過滲透壓測定的方法,也應該是一種物理化學方法。
4,氣相滲透法(VPO)。利用純溶劑與加入溶質的溶液飽和蒸氣壓不同來測定分子量。測出的是數均分子量。
5,光散射/小角激光光散射(LALLS)。這兩個方法只是儀器,數據處理和所用光源等方面有差異,原理差不多的。這種方法比較常用,而且儀器現在也發展到了一定水平,是測試高分子絕對分子量最有效的方法。
6,超速離心沉降。很復雜,最先用於蛋白質分子的測量。是一種相對方法。
7,凝膠色譜法(GPC)。很常用,根據不同大小的分子在介質中的停留時間不同來測量分子量。是一種相對方法,須結合其它方法的配合。
8,粘度法。利用玻璃粘度計(烏式粘度計,奧式粘度計)增比粘度,然後外推特性粘數,根據Mark-Houwink方程算出分子量,是最經濟的方法吧,而且重新度很好。水溶性高分子一般都用這種方法測量分子量,也是一種相對方法。

6. 列舉幾種測量分子大小的方法

一滴水的體積是多少,算出一滴水是多少個分子 除以個數

7. 測定蛋白質分子量的常用方法

知道蛋白質分子量、氨基酸組成計算器
http://www.proteomics.com.cn/tools/mwcal/

一般的方法:
SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳法測定蛋白質的分子量

[原理]

十二烷基硫酸鈉(Sodium dodecyl sulfate, 簡稱SDS)-聚丙烯醯胺凝膠電泳法測定蛋白質的分子量,是六十年代末Weber和Osborn在Shapiro等人在實驗基礎上發展起來的一項新技術。用這種方法測定蛋白質的分子量具有快速靈便,設備簡單等優點。

蛋白質的電泳遷移率在一般的電泳方法中,主要取決於它在某PH下所帶的凈電荷量、分子大小(即分子量)和形狀的差異性,而SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳對大多數蛋白質,主要取決於它們的分子量,與原有的電荷量和形狀無關。

SDS是一種陰離子表面活性劑,在一定的條件下,它能打開蛋白質氫鍵和疏水鍵,並按比例地結合到這些蛋白質分子上形成帶負電荷的蛋白質-SDS復合物,每克蛋白質一般結合1.4克SDS。SDS與蛋白質的定比結合使蛋白質-SDS復合物均帶上相同的負電荷,其量遠遠超過蛋白質原有的電荷量,因而掩蓋了蛋白質間原有的電荷差異。在水溶液中,蛋白質-SDS復合物具有相同的構象,近似雪茄煙形的長橢園棒(短軸均為1.8nm,長軸則隨蛋白質的分子量成正比變化),克服了蛋白質間原有的形狀差異。這樣蛋白質-SDS復合物在凝膠中的遷移率不再受原有電荷和形狀的影響,而只是蛋白質分子量的函數。蛋白質分子量與電泳遷移率間的關系可用下式表示:

lgMr = K – bm

式中 Mr為分子量;K為常數;b為斜率;m為遷移率。

因此,用本法測定蛋白質的分子量只需根據待測蛋白質在已知分子量的標准蛋白質的lgMr~遷移率的圖中的位置,就能得知分子量。

用本法測得的分子量,除單鏈蛋白質外,均不是天然蛋白質的完整分子量,而是組成這些蛋白質的亞基或肽鏈的分子量。本法對一些電荷異常,或構象異常,或帶有大輔基的蛋白質不適用,如組蛋白F1和某些糖蛋白等。對一些結構蛋白如膠原蛋白等也不適用。

SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳按照凝膠電泳系統中的緩沖液、pH值和凝膠孔徑的差異可分為SDS-連續系統電泳和 SDS-不連續系統電泳兩類;按照所製成的凝膠形狀和電泳方式又可以分為SDS-聚丙烯醯胺凝膠垂直管型電泳和SDS-聚丙烯醯胺凝膠垂直板型電泳兩類。

本實驗採用SDS-不連續垂直板型操作方法。通過實驗使學生掌握SDS-聚丙烯醯胺凝膠垂直板式電泳的原理及技術,包括制膠、灌膠、加樣、剝膠及固定染色等,學會用這些方法測定蛋白質分子量。

[方法與步驟]

一、加樣液的制備

1、標准蛋白質加樣液的制備 稱取細胞色素,胰凝乳蛋白酶原,胃蛋白酶,卵白蛋白,牛血清白蛋白各0.5~1mg,置小離心管(Eppendorf管)中,加入樣品溶解液1mL,充分溶解,如有不溶物應離心除去。沸水浴熱處理3min,冷卻備用。

2、待測蛋白質加樣液的制備

根據待測蛋白質樣品存在的狀況而定。

(1)固體

待測蛋白樣品,如為無鹽的純蛋白質固體制劑,加樣液的制備方法同標准蛋白質加樣液的制備;如為含鹽的純蛋白質固體制劑,應先加水充分溶解,對透析緩沖液透析12~16h,然後吸取0.5mL(蛋白濃度應為0.5~1mg/mL),置Eppendorf管中,並加入等體積濃樣品溶解液,沸水浴熱處理3min,冷卻備用。

(2)液體

待測蛋白樣品,如為無鹽的純蛋白質液體制劑,則加入等體積濃樣品溶解液,然後熱處理;如為含鹽的液體制劑,則需先透析。

二、凝膠的制備

1、凝膠板的准備

(1)洗板

將洗潔精用溫水稀釋後,用它浸透海綿擦洗玻板,然後用自來水洗凈,再用酒精將板擦乾。

(2)安裝制膠板

制膠前將玻板與塑料嵌條和凹型陶瓷板的邊緣對齊,下沿用密封膠帶封口,用塑料夾子或鐵夾子將兩端夾好,注意要確保密封,安放在固定架上。

2、分離膠和濃縮膠溶液的配製

組 分
分離膠/mL
濃縮膠/mL

凝膠貯備液
2.5
0.26

分離膠緩沖液(pH8.8)
1.9


濃縮膠緩沖液(pH6.8)

0.5

10%SDS
0.075
0.02

TEMED
0.026
0.02

雙蒸水
3.05
1.22

10%過硫酸銨
0.013
0.02

總體積
7.6
2

注意:①最後加入10%過硫酸銨溶液,混合製成凝膠液,迅速灌制凝膠。

②丙烯醯胺和甲叉雙丙烯醯胺均為神經毒劑,對皮膚有刺激作用。因此必須小心操作,不得吸入和接觸皮膚,聚合完全聚丙烯醯胺凝膠無毒。

3、制分離膠

將制膠板垂直放好,插上與相應厚度的樣品梳,在梳子下緣線1cm處做標記,卸下樣品梳。將配好的分離膠溶液緩慢加入制膠板之間,直至液面達到標記處。用滴管貼近膠液界面小心而又緩慢地覆蓋厚度約0.5cm的正丁醇層,以防止溶液蒸發並保證膠面平整。

4、制濃縮膠

分離膠聚合後,倒去正丁醇,用蒸餾水沖洗分離膠膠面兩次,用濾紙吸去殘液。用滴管將濃縮膠溶液加在分離膠面上,充滿制膠板,插入樣品梳。

(三)電泳

1、安裝電泳槽

濃縮膠聚合後,除去梳子、密封膠帶以及六個鐵夾。將制膠扳、電泳糟內芯、另一對制膠板依次放入槽內。兩制膠板的凹型陶瓷板均應與電泳槽內芯接觸。然後插入楔型板以固定兩套制膠板。如果每次電泳只用一塊膠板,必須用提供的有機玻璃板代替另一套制膠板。

2、加樣

在內外水槽加註緩沖液,使內外槽的水位均超過凹形板的缺口但低於塑料板的上沿。用微量加樣器在梳井內加樣。

3、電泳

蓋好上蓋,在80V~100V的電壓下電泳約3h,至溴酚藍指示的電泳前沿到達制膠板的下緣止,關掉電源。然後拔掉楔形板,取下制膠扳。

(四)染色、脫色

用刀片或薄板將白塑料板與陶瓷板輕輕撬開,用刀片沿分離膠與濃縮膠的交接處,將分離膠切下,並在分離膠的左上角切掉一小角,以標記樣品順序。然後手戴橡膠手套將分離膠小心移入染色器皿中。在染色器皿中加入100mL考馬氏亮藍染液(含0.25%考馬氏亮藍R-250,30%乙醇,10%乙酸的水溶液),加蓋,在搖床上染色2h。

將染液倒回貯存瓶(可反復使用)。在染色皿中加入100mL脫色液(10%乙酸,30%乙醇),振盪脫色至蛋白條帶清晰。

[結果和計算]

1、凝膠脫盡底色後,色帶清晰顯出。按實樣描下或攝下電泳圖譜。

2、根據各蛋白遷移距離和染料遷移距離的比值,求出各蛋白的相對遷移率mr,然後作出lgMr~mr關系圖,從圖中找出未知蛋白mr對應的分子量。

8. 總結一下測定分子量的大小,哪些是絕對方法哪些是間接方法其優缺點如何

聚合物平均分子量為平均聚合度與聚合單元分子量的乘積。
測定聚合物分子量的方法很多,例如:化學方法—端基分析法;熱力學方法—沸點升高法、冰點降低法、蒸汽壓下降法、滲透壓法;光學方法—光散射法;動力學方法—粘度法;超速離心沉澱及擴散法;其他方法—電子顯微鏡及凝膠滲透色譜法。
測定數均分子量的方法有冰點下降法、沸點升高法、蒸氣壓下降法、滲透壓法以及端基分析法等。 重均分子量的測定方法有光散射法、超速離心沉降速度法以及凝膠色譜法等。 粘均分子量通常用粘度法測得。
各種方法都有各自優缺點和適用的分子量范圍,各種方法得到的分子量的統計平均值也不相同,如下表所示。
不同平均分子量測定方法及其適用范圍 平均分子量 方法 類型 分子量范圍(g/mol) Mn

9. 簡述測量蛋白質相對分子質量的方法

1。根據化學組成測定最低分子量
用化學分析方法測出蛋白質中某一微量元素的含量,並假設分子中只有一個這種元素的原子,就可以計算出蛋白質的最低分子量。
2.
滲透壓法
當蛋白質濃度不大時,可用以下公式:
M=RT/lim(∏/C)
其中R是氣體常數(0.082),T是絕對溫度,∏是滲透壓(以大氣壓計),濃度單位是g/L。
3.
沉降速度法:
M=RTs÷D(1-Vρ)
其中s是沉降系數,D是擴散系數,
ρ是溶劑的密度,
V是蛋白質的偏微分比容。
4.
SDS-PAGE法:
lgM=K1-K2μR
其中K1和K2是與試驗條件有關的常數。用已知分子量的標准蛋白作標准曲線,即可求出未知蛋白的分子量。

10. 測定原子量或分子量的方法有什麼及原理個是什麼

分子量,組成分子的所有原子的原子量的總和。
在准確地推出化學式以前,一個亟待解決的問題就是分子的性質,特別是對於分子量的准確把握。同分異構表明具有相同實驗式不同分子量的聚合物使問題變得更為復雜。由此可知一個確信無疑的分子量對於寫出化全物的分子式的重要性。
19世紀中期,分子量的計算仍然是不可靠的,揣測和人為規定在這時期是司空見慣的,甚至連碳和氧的原子量也提法不一。
這時,有一位化學家看到了阿佛加德羅假說可以提供一條線索把諸多麻煩的事實穿在一起,這位化學家就是義大利人康尼查羅。1826年,康尼查羅生於義大利,幼時長於算學,15歲學醫,19歲到拿波斯學習化學,21歲參加了西西里起義,失敗之後僑居法國,開始了長期的化學研究工作。
1858年,康尼查羅在科學雜志上發表了《經學哲理課程提綱》一文,概述了阿佛加德羅假說在教學中的應用。他根據水銀及其揮發性化合物蒸氣密度的測定,建議將日拉爾所取得的原子量增加一倍。又根據汞的化合物與其他金屬化合物有相似的地方,建議將銅、鋅和錫的原子量加倍,康尼查羅根據金屬有機物蒸氣密度的測定結果和另外的實驗資料,提出了必須改進許多金屬的原子量,以及大量金屬與基化合能力的資料統計。正確分子量的提供,是在康尼查羅論證佛加羅德羅假說的正確性時做出一個貢獻,這一工作也使阿氏假說得到了新生。
康尼查羅指出,應用阿佛加德羅和安培的假說,即使在物質的組成尚不知道情況下,也可以測定它的分子量。根據上述假說,分子量與氣態物質的密度成正比。康尼查羅在測定物質分子量時,選取氣體中最輕的氫氣作為比較的基準。他規定氫氣的密度為2,因此,氫的分子量就是2.因為他認識到氫分子中含有2個氫原子,如果規定氫分子量為1作為基準,氫的原子量就將是1/2了。
康尼查羅在測定分子量的基礎上,結合化學分析的結果,提出了一個合理的確定原子量的方案,取得了很好的效果。在化學理論發展中康尼查羅做出了很大貢獻。值得指出的是,測定分子量以及限定原子、分子等概念的嚴格定義,是他多年從事教學工作的結果。然而,遺憾的是康尼查羅的論文發表後,並未引起應有的重視。

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