細菌數量的測量方法

1. 細菌菌落總數的測定方法

菌落總數的測定，一般將被檢樣品製成幾個不同的10倍遞增稀釋液，然後從每個稀釋液中分別取出1mL置於滅菌平皿中與營養瓊脂培養基混合，在一定溫度下，培養一定時間後（一般為48小時），記錄每個平皿中形成的菌落數量，依據稀釋倍數，計算出每克（或每ml）原始樣品中所含細菌菌落總數。
基本操作一般包括：樣品的稀釋－－傾注平皿－－培養48小時－－計數報告。
國內外菌落總數測定方法基本一致，從檢樣處理、稀釋、傾注平皿到計數報告無何明顯不同，只是在某些具體要求方面稍有差別，如有的國家在樣品稀釋和傾注培養進，對吸管內液體的流速，稀釋液的振盪幅度、時間和次數以及放置時間等均作了比較具體的規定。

2. 食品中細菌總數和菌落總數是怎麼樣測定的

食品中細菌總數和菌落總數的測定方法如下：

平板培養計數法

實驗方法原理

菌落總數是指食品經過處理，在一定條件下培養後，所得1 g或1 ml檢樣中所含細菌菌落總數。菌落總數主要作為判別食品被污染程度的標志，也可以應用這一方法觀察細菌在食品中繁殖的動態，以便對被檢樣品進行衛生學評價時提供依據。菌落總數並不表示樣品中實際存在的所有細菌總數，菌落總數並不能區分其中細菌的種類，所以有時被稱為雜菌數，需氧菌數等。 實驗材料

瓊脂培養基 食品檢樣

試劑、試劑盒

乙醇生理鹽水氫氧化鈉溶液

儀器、耗材

電熱恆溫培養箱、冰箱、恆溫水浴鍋、托盤、天平、電爐、吸管、廣口瓶、三角瓶、玻璃珠、平皿、試管、試管架、酒精燈、均質器、乳缽、滅菌刀、剪刀、滅菌鑷子、酒精、棉球、玻璃、蠟筆、登記薄

實驗步驟

一、檢驗程序

菌落總數檢驗程序見圖5—1

二、檢樣稀釋及培養

1. 以無菌操作，將檢樣25 g(或25 mL)剪碎以後，放於含有225 mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(瓶內預先置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內，經充分振搖或研磨做成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液後，最好置滅菌均質器中以8 000 r／min—1 0000 r／mln的速度處理1 min做成1：10的均勻稀釋液。

2. 用1 mL滅菌吸管吸取1：10稀釋液1 mL，沿管劈徐徐注入台有9 mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(注意吸管尖端不要觸及管內稀釋液，下同)，振搖試管混合均勻，做成1：100的稀釋液。

3. 另取1 mL的滅菌吸管，按上項操作順序作10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用1支1 mL滅菌吸管。

4. 根據食品衛生標准要求或對檢樣污染情況的估計，選擇2—3個適宜稀釋度，分別在作10倍遞增稀釋的同時，即以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液於滅菌平皿內，每個稀釋度作兩個平皿。

5. 稀釋液移入平皿後，應及時將涼至46℃營養瓊脂培養基[可放置在(45土1) ℃水浴鍋內保溫注入平皿15 mI一20 mL，並轉動平皿位混合均勻，同時將營養瓊脂培養基傾入加有1 mL稀釋液(不含樣品)的滅菌平皿內作空白對照。

6. 待瓊脂凝固後，翻轉平板，置(36土1) ℃恆溫箱內培養(48土2) h取出板內菌落數目，乘以稀釋倍數，即得I g(1 mL)樣品所含菌落總數。

注意事項

1. 平板培養計數法只能檢出生長的活菌，不能檢出樣品中全部的細菌數，總是比實際生存在食品中的細菌數要少，這是因為食品中存在多種細菌，它們的生活特性各異，不可能在統一培養條件下全部生長出來。但是，仍能藉此評定整個食品被細菌污染的程度，所以目前一般食品的衛生檢驗中都普遍採用這種方法。

2. 平板菌落計數測定食品中的菌落總數，一般均採用中溫培養，特別是已屬於直接供食用的製成食品，因為這些食品衛生的要求，是嚴格防止消化道傳染病病原菌和食物中毒病原菌污染，這些病原菌都屬於嗜溫性菌，因而測定細菌數時，採用中溫培養是比較合理的。

3. 如何測物品上的細菌數量我是高中生方法盡可能簡單的闡述 ~

一。使用細菌總數測試片，只需要購買細菌總數測試片，再按要求使用，有說明書。
二。紅細胞計數法
首先要了解這個方法的原理。把N個紅細胞與細菌均勻混合，再數出一小塊區域內的紅細胞數n和細菌數m。因為細胞已經均均勻混合，所以，局部的細胞數比和整體的細胞數比是接近相同的。即 n/m=N/M (n為局部紅細胞數， N為總紅細胞數，m為局部細菌數，M為總細菌數）n,m已數出。N又已知。所以總細菌數N就可以算出來。再取幾個局部，算平均值，就能得到較精確的細菌數目。
如果這樣做，只要數出一小塊區域內的細菌數就可以知道總細菌數。如果不加紅細胞，一個一個數，用要數到何年何月啊！細菌可是對數增長。加入紅細胞的作用就像比例尺一樣，地圖上總有1：XXX的比例尺，你在顯微鏡的一個是視野里看到的紅細胞數目就像地圖上你測得的距離，數清一個是視野的菌數後，乘以相應分散度就可以了，分散度時用紅細胞算的，具體的教材上應該有。不用也可以，不過要換成相應大小別的東西代替，總之用光學顯微鏡差菌數，這是不可缺少的。

這里運用了樣方法，就是在若干樣方中計數全部個體，然後將其平均數推廣，來估計種群總體數量的方法。樣方法相關知識：
①樣 方： 樣方也叫樣本，從研究對象的總體中抽取出來的部分個體的集合，叫做樣方。

②隨機取樣： 在抽樣時如果總體中每一個個體被抽選的機會均等，且每一個個體被選與其他個體間無任何牽連，那麼，這種既滿足隨機性，又滿足獨立性的抽樣，就叫做隨機取樣(或叫做簡單隨機取樣)。隨機取樣不允許摻入任何主觀性，否則，就難以避免調查人員想獲得調查屬性的心理作用，往往使調查結果偏大。

③適用范圍：植物種群密度，昆蟲卵的密度 ，蚜蟲、跳蝻的密度，細菌數量測量等。
樣方法取樣方法
①點狀取樣法點狀取樣法中常用的為五點取樣法，如圖A，當調查的總體為非長條形時，可用此法取樣。在總體中按梅花形取5個樣方，每個樣方的長和寬要求一致。這種方法適用於調查植物個體分布比較均勻的情況。
②等距取樣法當調查的總體為長條形時，可用等距取樣法，如圖B，先將調查總體分成若乾等份，由抽樣比率決定距離或間隔，然後按這一相等的距離或間隔抽取樣方的方法,叫做等距取樣法。例如，長條形的總體為100 m長，如果要等距抽取10樣方，那麼抽樣的比率為1/10，抽樣距離為10 m，然後可再按需要在每10 m的前1 m內進行取樣，樣方大小要求一致。

樣方法的兩種邊角統計方式如下圖（紅色為需統計邊線）

樣方法具體步驟如下：

①確定調查對象；

②選取樣方：必須選擇一個該種群分布較均勻的地塊，使其具良好的代表性；

③計數：計數每個樣方內該種群數量；
樣方法的兩種邊角統計方式
④計算：取各樣方平均數。

4. 細菌檢測最簡單的方法

一.使用細菌總數測試片,只需要購買細菌總數測試片,再按要求使用,有說明書.
二.紅細胞計數法
首先要了解這個方法的原理.把N個紅細胞與細菌均勻混合,再數出一小塊區域內的紅細胞數n和細菌數m.因為細胞已經均均勻混合,所以,局部的細胞數比和整體的細胞數比是接近相同的.即 n/m=N/M (n為局部紅細胞數,N為總紅細胞數,m為局部細菌數,M為總細菌數）n,m已數出.N又已知.所以總細菌數N就可以算出來.再取幾個局部,算平均值,就能得到較精確的細菌數目.
如果這樣做,只要數出一小塊區域內的細菌數就可以知道總細菌數.如果不加紅細胞,一個一個數,用要數到何年何月啊!細菌可是對數增長.加入紅細胞的作用就像比例尺一樣,地圖上總有1：XXX的比例尺,你在顯微鏡的一個是視野里看到的紅細胞數目就像地圖上你測得的距離,數清一個是視野的菌數後,乘以相應分散度就可以了,分散度時用紅細胞算的,具體的教材上應該有.不用也可以,不過要換成相應大小別的東西代替,總之用光學顯微鏡差菌數,這是不可缺少的.
這里運用了樣方法,就是在若干樣方中計數全部個體,然後將其平均數推廣,來估計種群總體數量的方法.樣方法相關知識：
①樣 方：樣方也叫樣本,從研究對象的總體中抽取出來的部分個體的集合,叫做樣方.
②隨機取樣：在抽樣時如果總體中每一個個體被抽選的機會均等,且每一個個體被選與其他個體間無任何牽連,那麼,這種既滿足隨機性,又滿足獨立性的抽樣,就叫做隨機取樣(或叫做簡單隨機取樣).隨機取樣不允許摻入任何主觀性,否則,就難以避免調查人員想獲得調查屬性的心理作用,往往使調查結果偏大.
③適用范圍：植物種群密度,昆蟲卵的密度 ,蚜蟲、跳蝻的密度,細菌數量測量等.
樣方法取樣方法
①點狀取樣法點狀取樣法中常用的為五點取樣法,如圖A,當調查的總體為非長條形時,可用此法取樣.在總體中按梅花形取5個樣方,每個樣方的長和寬要求一致.這種方法適用於調查植物個體分布比較均勻的情況.
②等距取樣法當調查的總體為長條形時,可用等距取樣法,如圖B,先將調查總體分成若乾等份,由抽樣比率決定距離或間隔,然後按這一相等的距離或間隔抽取樣方的方法,叫做等距取樣法.例如,長條形的總體為100 m長,如果要等距抽取10樣方,那麼抽樣的比率為1/10,抽樣距離為10 m,然後可再按需要在每10 m的前1 m內進行取樣,樣方大小要求一致.
樣方法的兩種邊角統計方式如下圖（紅色為需統計邊線）
樣方法具體步驟如下：
①確定調查對象；
②選取樣方：必須選擇一個該種群分布較均勻的地塊,使其具良好的代表性；
③計數：計數每個樣方內該種群數量；
樣方法的兩種邊角統計方式
④計算：取各樣方平均數.

5. 紫外分光光度計如何測量細菌數目

【1】可以紫外分光法測量：OD是optical delnsity（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度。通常400～700nm 都是微生物測定的范圍，需要紫外分光光度計測最大吸收波長。你是什麼菌種？用得最多的就是505nm測菌絲菌體、560nm測酵母、600nm測細菌。 用測OD方法畫微生物生長曲線時，同一株菌的起始培養濃度可以准備多管（根據檢測點的需要，如需檢測10個點，就准備10管），然後每個點取一管出來測OD值就行了。
【2】還有就是利用瓊脂板塗板法： 是最准確地一種，可以知道活菌的數量。可以用OD600,對瓊脂板塗板法的菌落數做條曲線，以後就測OD就可以測量細菌的數目了。

6. 測定微生物數量的方法

現在用的多的就是這幾種，樓主挑著看吧

細菌計數1.計數器測定法：
即用血細胞計數器進行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置於血細胞計數器的計數室內，用顯微鏡觀察計數。由於計數室的容積是一定的(O.1mm3)，因而根據計數器刻度內的細菌數，可計算樣品中的含菌數。本法簡便易行，可立即得出結果。
本法不僅適於細菌計數，也適用於酵母菌及黴菌孢子計數。
2、電子計數器計數法:
電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化，小孔僅能通過一個細胞，當一個細胞通過這個小孔時，電阻明顯增加，形成一個脈沖，自動記錄在電子記錄裝置上。
該法測定結果較准確，但它只識別顆粒大小，而不能區分是否為細菌。因此，要求菌懸液中不含任何碎片。
3、活細胞計數法
常用的有平板菌落計數法，是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然後將定量的稀釋液進行平板培養，根據培養出的菌落數，可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高，是一種檢測污染活菌數的方法，也是目前國際上許多國家所採用的方法。使用該法應注意：①一般選取菌落數在30～300之間的平板進行計數，過多或過少均不準確；②為了防止菌落蔓延，影響計數，可在培養基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用於形成菌落的微生物。
廣泛應用於水、牛奶、食物、葯品等各種材料的細菌檢驗，是最常用的活菌計數法。
4、比濁法
比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定范圍內與透光度成反比，與光密度成正比，所以，可用光電比色計測定菌液，用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。
此法簡便快捷，但只能檢測含有大量細菌的懸浮液，得出相對的細菌數目，對顏色太深的樣品，不能用此法測定。
5、測定細胞重量法
此法分為濕重法和乾重法。濕重法系單位體積培養物經離心後將濕菌體進行稱重；乾重法系單位體積培養物經離心後，以清水洗凈放人乾燥器加熱烘乾，使之失去水分然後稱重。
此法適於菌體濃度較高的樣品，是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。
6、測定細胞總氮量或總碳量
氮、碳是細胞的主要成分，含量較穩定，測定氮、碳的含量可以推知細胞的質量。此法適於細胞濃度較高的樣品。
7、顏色改變單位法（colour change unit,簡稱CCU）
這種方法通常用於很小，用一般的比濁法無法計數的微生物，比如支原體等，因為支原體的液體培養物是完全透明的，呈現為清亮透明紅色，因此無法用比濁法來計數，由於支原體固體培養很困難，用cfu法也不容易計數，因此需要用特殊的計數方法，即CCU法。它是以微生物在培養基中的代謝活力為指標，來計數微生物的相對含量的，下面以解脲脲原體為例單介紹其操作：，簡
（1）取12隻無菌試管，每一管裝1.8ml解脲脲原體培養基。
（2）在第一管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液，充分混勻，從中吸取0.2ml加入第二管，依次類推，10倍梯度稀釋，一直到最末一管
（3）於37度培養，以培養基顏色改變的最末一管作為待測菌液的CCU，也就是支原體的最大代謝活力，比如第六管出現顏色改變，他的相對濃度就是10的6次方CCU/ml.
一般來說，比濁法和菌落計數法就可以滿足絕大多數細菌的計數，但是對支原體這樣比較特殊的微生物，用CCU法比較合適。

7. 如何檢測空氣中細菌總數

檢測空氣中細菌總數的方法：撞擊法
原理：採用撞擊式空氣微生物采樣器采樣通過抽氣動力作用，使空氣通過狹縫或小孔而產生高速氣流，從而使懸浮在空氣中的帶菌粒子撞擊到營養瓊脂平板上,經37℃、48h培養後，計算每立方米空氣中所含的細菌菌落數的采樣測定方法。

8. 如何測量微生物的菌數

日常生活中我們需要進行菌落總數檢測的除了我們關心的各種食物外，還有水、化妝品、空氣等。每種都有對應的檢測標准和方法。此外，還有關於公共場所的衛生標准里也有一些物品是需要進行菌落計數的，比如旅館里的浴缸，毛巾，拖鞋，卧具，茶具，理發店的理發用具等等，對於這些物品的菌落計數，我們一般會採用用無菌生理鹽水濕潤的棉拭子在相應位置塗抹一定面積（如茶具是在內、外緣塗抹50平方厘米），然後放入10毫升生理鹽水內，振盪混勻後1:10稀釋（通常會做1:10,1:100和1:1000三個稀釋度），吸取1毫升稀釋後的檢樣注入滅菌平板。平板放在適宜的溫度培養，等平板上長出來菌落進行菌落計數也是有一套標准來進行判讀和計算的（內容還是比較多的，手懶不想打了。）總之，這樣計數出來的結果，我們稱之為菌落總數。

其實，在評價衛生質量尤其是食品的衛生質量時，還有一個重要的指標——大腸菌群：一群能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌，因為主要來源是人畜糞便，因此能作為糞便污染指標來評價食品的衛生質量，推斷食品中有無污染腸道致病菌的可能。食品中的大腸菌群數以100毫升（克）檢樣內大腸菌群最可能數（MPN）表示。最後，衛生部門還會對相應的致病菌進行專門的檢測，沙門菌、志賀菌、副溶血弧菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、蠟樣芽孢桿菌等等都有一套完整的檢測流程和標准。

9. 食品安全檢驗中細菌總數的測定有哪幾中方法

現在一般是用平板計數法，以前的標準是用營養瓊脂，新標准時用平板計數瓊脂。還可以用快速測試紙檢驗。前者比較普遍。