『壹』 MDA(丙二醛)含量的計算公式還有單位是什麼
大哥什麼裡面測量含量?我給的是動物內臟里測它的含量
MDA(nmol/mg蛋白)=樣品高峰-空白高峰/標准高峰-空白高峰*5nm/樣品含量*實際用量
『貳』 丙二醛的提取及含量測定的方法
剛做完畢業設計正好也有,就跟你分享吧。希望能幫到你。
丙二醛(MDA)含量的測定
① 測定步驟
稱取剪碎的試材1g,加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂,研磨至勻漿,再加8mlTCA進一步研磨,勻漿在4000r/min離心10分鍾,上清液為樣品提取液。吸取離心的上清液2ml(對照加2ml蒸餾水),加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液,混勻物於沸水浴上反應15min,迅速冷卻後再離心。取上清液測定532、600和450nm波長下的吸光度。
② 計算
(3-6)
式中:C—MDA的濃度, ;
A450,A532 和A600—分別代表450、532和600nm波長下的吸光度值。
『叄』 丙二醛用TBA檢測為什麼要測600nm的值
600nm一般用於排除非特異性吸收,如樣本自身的濁度或者顏色所導致吸光值上升,最終要減去
丙二醛在酸性和高溫條件,可以與硫代巴比妥酸(TBA)反應生成紅棕色的三甲川(3,5,5—三甲基惡唑2,4-二酮),在532nm處有最大光吸收,在600nm處有最小光吸收,該復合物的吸光系數為155[mmol/( L.cm )] ,可按公式:A532-A600=155000×C×L算出MDA濃度C(μmol/L),進一步算出單位重量鮮組織中 MDA 含量(μmol/g)。式中,A532和A600分別表示532nm和600nm處的吸光度值。L為比色杯厚度(cm )。
需要指出的是,植物組織中糖類物質對MDA-TBA反應有干擾作用。為消除這種干擾,經試驗,可用下列公式消除由蔗糖引起的誤差。
C(μmol/L)=6.45(A532-A600)-0.56A450
式中: A450、A532和A600分別表示450nm、532nm 和600nm處的吸光度值。算出植物樣品提取液中MDA的濃度後,可進一步算出其在植物組織中的含量。
『肆』 丙二醛的測量方法
一:原理
丙二醛(MDA)是常用的膜脂過氧化指標,在酸性和高溫度條件下,可以與硫代巴比妥酸(TBA)反應生成紅棕色的三甲川(3,5,5-三甲基惡唑-2,4-二酮),其最大吸收波長在532nm。但是測定植物組織中MDA時受多種物質的干擾,其中最主要的是可溶性糖,糖與TBA顯色反應產物的最大吸收波長在450nm,但532nm處也有吸收。植物遭受乾旱、高溫、低溫等逆境脅迫時可溶性糖增加,因此測定植物組織中MDA—TBA反應物質含量時一定要排除可溶性糖的干擾。低濃度的鐵離子能夠顯著增加TBA與蔗糖或MDA顯色反應物在532、450nm處的消光度值,所以在蔗糖、MDA與TBA顯色反應中需一定量的鐵離子,通常植物組織中鐵離子的含量為每克千重100—300ug/g,根據植物樣品量和提取液的體積,加入Fe3+的終濃度為0.5umol/L。
二:試劑
1:質量分數為10%三氯乙酸(TCA);
2:質量分數0.6%硫代巴比妥酸:先加少量的氫氧化鈉(1mol·L-1)溶解,再用10%的三氯乙酸定容;
三:方法
1:MDA的提取 稱取剪碎的試材1g,加入2mll0%TCA和少量石英砂,研磨至勻漿,再加8mlTCA研磨,勻漿在4000r/min離心10min,上清液為樣品提取液。
2:顯色反應和測定 吸取離心的上清液2ml(對照加2ml蒸餾水),加入2ml0.6%TBA溶液,混勻物於沸水浴上反應15min,迅速冷卻後再離心。取上清液測定532、600和450nm波長下的消光度。
四:結果
C1=11.71D450
C2={6.45(D532 - D600) - 0.56D450}NW-1
C1——可溶性糖的濃度(mmol/L)
C2——MDA的濃度(·umol/L)
D450、0532、D600分別代表450、532和600nm波長下的消光度值。
N:提取液總體積(ml)
W:植物組織鮮重
『伍』 丙二醛測量方法
我看見有一個答案。。。
『陸』 丙二醛含量的測定中為什麼要加TCA
TCA與蛋白質之間主要有以下幾個方面的作用:①在酸性條件下與蛋白質形成不溶性鹽.②作為蛋白質變性劑使蛋白質構象發生改變,暴露出較多的疏水性基團,使之聚集沉澱.③隨著蛋白質分子量的增大,其結構復雜性與緻密性越大,TCA可能滲入分子內部而使之較難被完全除去,在電泳前樣品加熱處理時可能使蛋白質結構發生酸水解而形成碎片,而且隨時間的延長這一作用愈加明顯; 在電泳時使用TCA對蛋白質樣品的濃縮或除鹽時,對於分子質量大的蛋白質,要慎重選擇TCA.對小分子量蛋白質的濃縮,採用TCA時也有兩點需要注意:一是用TCA沉澱後,盡量用丙酮徹底抽提TCA;二是樣品處理後要盡快進行電泳分析,以免發生聚集及斷裂,造成結果分析的不準確。
『柒』 丙二醛的檢測方法
含有醛基 可與氫氧化銅溶液煮沸反應生成 氧化亞銅磚紅色沉澱 或與銀氨溶解發生銀鏡反應
『捌』 丙二醛的提取與含量測定
剛做完畢業設計正好也有,就跟你分享吧。希望能幫到你。丙二醛(MDA)含量的測定① 測定步驟稱取剪碎的試材1g,加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂,研磨至勻漿,再加8mlTCA進一步研磨,勻漿在4000r/min離心10分鍾,上清液為樣品提取液。吸取離心的上清液2ml(對照加2ml蒸餾水),加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液,混勻物於沸水浴上反應15min,迅速冷卻後再離心。取上清液測定532、600和450nm波長下的吸光度。② 計算 (3-6)式中:C—MDA的濃度, ; A450,A532 和A600—分別代表450、532和600nm波長下的吸光度值。