酶標儀動態測量方法

㈠ ELISA酶標儀,能連續動態測量OD值嗎，就是橫坐標為時間，縱坐標為OD值

可以連續讀出OD數值，如果不可以的話，醫院那麼大標本量如何能連續實驗呢。

㈡ 酶標儀檢測luminescence怎麼設置

酶標儀檢測luminescence一般設置為0.1S~1S。

用來進行可見光與紫外光吸光度的檢測，特定波長的光通過微孔板中的樣品後，光能量被吸收，而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關系，由此可以用來定性和定量的檢測，光吸收的檢測技術成熟，成本低，操作簡單。

但是動態范圍窄，靈敏度比較低，特異性不強，一般可見光和紫外光分別採用鎢燈及氘燈作為光源，而紫外/可見酶標儀是可以將兩種光源進行切換，適應不同測量波長的需求。

酶標儀檢測介紹：

通過發射光柵後到達檢測器，熒光的強度與樣品的濃度呈一定的比例，熒光檢測靈敏度高，可實時檢測，檢測模式多樣，但是容易受外界干擾，激發光與發射光容易互相影響，干擾檢測。

來自生物化學反應中的自發光，可分為輝光型和閃光型兩種類型，輝光型發光持久，穩定，能持續一段時間；閃光型發光時間短，變化快，穩定性不強需要應用自動加樣器才可以進行，化學發光中發出的光子數與樣品量呈一定比例關系。

㈢ 酶活力的測定方法及原理

酶活力的測定方法：有兩種主要方法即終止反應法和連續反應法。
終止反應法：是在恆溫反應系統中，每隔一定時間，取出一定體積的反應液，用強酸強鹼或SDS以及加熱等使反應立即停止，然後用化學法放射性化學法或酶偶聯法分析產物的形成量或底物的消耗量。這是最經典的酶活力測定方法，幾乎所有的酶都可以根據這一原理設計出具體的測定方法。
連續反應法：無須終止反應，而是在酶反應過程中用光化學儀器或電化學儀器等來監測反應的進行情況，對記錄結果進行分析，然後計算出酶活力。
酶活性測定的原理：
1. 超氧物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）
活性的測定 SOD採用氮藍四唑（nitro-blue tetrazolium，NBT）法（Beauchamp和Fridovich，1971）。反應步驟為：取200μl粗提液，加入3.7 ml NBT反應液50mmol/LpH7.8的磷酸緩沖液（PBS）配製的含77.12μmol/L氮藍四唑, 100μmol/LEDTA－Na2和13.37mmol/L甲硫氨酸溶液〕，在30℃下保溫2分鍾後加入100μl核黃素溶液（pH7.8的50mmol/L磷酸緩沖液中含80.2μmol/L 核黃素和100μmol/LEDTA－Na2），在4000Lx日光下反應20min。然後迅速測定A560。以不照光的管做空白。用酶標儀進行測定時按比例調整為總反應體積為400μL。酶活性按以下公式計算：以抑制NBT光化還原的50％為一個SOD活性單位，結果以U/mg蛋白表示。以加緩沖液代替酶液的作為對照。
SOD總活性＝(Ack－AE)×V/(Ack×0.5×W×Vt) 式中， Ack為照光對照管的吸光度；AE為樣品管的吸光度；V為樣品液總體積（ml）；Vt為測定時樣品用量（ml）；W為樣品鮮重（g）或蛋白質含量（mg）。
2. 過氧化氫酶（Catalase，CAT）
活性測定 CAT 活性參照Aebi (1984)[7]的方法進行測定。用酶標儀進行測定時按比例調整為總反應體積為400μL 。400 μL反應液含50 mmol/L的PBS (pH 7.0)，30 mmol/L的H2O2和50 µL粗酶液。反應從加入過氧化氫開始計時，連續測定在240 nm吸光度的降低值。酶活性定義為：一個過氧化氫酶單位相當於在規定條件下於溫度25℃，pH7.0條件下1分鍾分解1μmol過氧化氫所需酶量，結果以U/mg蛋白或U/g鮮重表示。
3. 多酚氧化酶（Polyphenoloxidase，PPO）
活性的測定 PPO活性測定採用鄰苯二酚法（Aquino-Bolaños和Mercado-Silva，2004）。用酶標儀進行測定時按比例調整為總反應體積為400μL。350µL反應液（用50mmol/L，pH6.4的PBS配製，內含100µmol/L鄰苯二酚）中加入50 µL的粗酶液，平衡1分鍾後連續測定398nm吸光度的變化。以1分鍾內398nm吸光度上升0.01為一個酶活性單位，結果以U/mg蛋白或U/g鮮重表示。
4. 過氧化物酶（Peroxidase，POD）
活性測定POD活性測定採用愈創木酚法（Lurie等，1997)。用酶標儀進行測定時按比例調整為總反應體積為400μL。反應體系為30μL粗酶液，290 µL 0.3%愈創木酚（用50 mmol/L的PBS配製，pH 6.4）和 80µL0.3%H2O2（用50 mmol/L的PBS配製，pH 6.4）。反應在加入H2O2 後開始准確記時。連續吸光度在470 nm的上升值。酶活性以每分鍾上升0.01為一個單位，結果以U/mg蛋白或U/g鮮重表示。

㈣ 用酶標儀如何測酶活

這東西是不可以直接測酶活的。 除非你的酶能使特定的底物顯色，然後再用酶標儀測出其OD值，再與標准品作對比才可以的哦。 還要注意的是，你使用的底物的吸收波長應該與酶標儀兼容。

㈤ 請問如何用酶標儀批量測DNA濃度簡述過程，謝謝！

如果沒有石英的酶標板，酶標儀不能發280nm的光就做不了。
現在很多酶標儀會配專門的核酸檢測板，上面有10幾個石英的光路系統，只要將2ul，甚至更少的樣品點到石英材料上，就可以一次測10幾個樣了。不過板子比較貴。
如果沒有配特製的板，最好要找一些微量的96孔板（例如半孔板），要求上樣量少，把DNA稀釋一定比例後加到酶標板每一個孔中（要保證最低加樣體積）進行檢測。比比色皿好的一點就是，不需要測一個樣，洗一次比色皿。

㈥ 如何用酶標儀檢測熒光（熒光，酶標儀，熒光

酶標儀的使用方法可以參考： 1.開啟儀器電源開關，預熱5分鍾，同時啟動電腦。 2.啟動Magellan.exe程序，加入程序主界面，儀器微孔板架同時自動打開。 3.將待測微孔板在板架上放好。 4.根據不同的測量要求，設置好測定波長和測量模式後，進行檢測

㈦ 酶標儀可以檢測哪些項目

檢測項目主要包含以下幾項：

1、傳染病類：例如肝炎，艾滋病，衣原體，肺炎支原體，梅毒，水痘等。

2、甲狀腺：促甲狀腺激素，T3T4等。

3、不孕症：性激素六項，泌乳素，雌三醇，生長素，抗精子抗體等。

4、優生優育：弓形蟲抗體，巨細胞病毒，風疹病毒等。

5、腫瘤標志物：癌胚抗原，甲胎蛋白，乳腺癌，卵巢癌，膀胱癌，胃腸癌等。

6、糖尿病：C肽，胰島素，胰島素抗體，胰島素原等。

7、過敏原，皮膚不耐受等。

萊恩德LD-96A酶標儀在食品以及農畜業的檢測項目包括：營養成分，添加劑，農葯殘留量，菌毒素，無機毒素，抗生素激素殘留，致癌物質殘留，有毒有害物質污染等。

酶標儀的分類：

按照酶標儀功能的劃分：

1、光吸收酶標儀：是用來進行可見光與紫外光吸光度的檢測，特定波長的光通過微孔板中的樣品後，光能量被吸收，而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關系，由此可以用來定性和定量的檢測，光吸收的檢測技術成熟，成本低，操作簡單，但是動態范圍窄。

靈敏度比較低，特異性不強，一般可見光和紫外光分別採用鎢燈及燈作為光源，而紫外/可見酶標儀是可以將兩種光源進行切換，適應不同測量波長的需求。

2、熒光酶標儀：是用來進行熒光的檢測，通過激發光柵分光後的特定波長的光照射到被熒光物質標定的樣品上後，會發出波長更長的發射光，通過發射光柵後到達檢測器。

熒光的強度與樣品的濃度呈一定的比例，熒光檢測靈敏度高，可實時檢測，使用方便，檢測模式多樣，但是容易受外界干擾，激發光與發射光容易互相影響，干擾檢測。

3、化學發光酶標儀：是來自生物化學反應中的自發光，可分為輝光型和閃光型兩種類型，輝光型發光持久，穩定，能持續一段時間；閃光型發光時間短，變化快，穩定性不強。

需要應用自動加樣器才可以進行，化學發光中發出的光子數與樣品量呈一定比例關系，化學發光酶標儀靈敏度非常高，動力學范圍廣。

㈧ 如何用酶標儀測定RNA濃度

換濾光片，340、280、260、230
石英的96孔板，每個孔的體積為200ul，空白直接200ulDEPC水，實驗組196ulPEPC水+4ulRNA
如果換了濾光片了，測試步驟與MTT測試步驟差不多，主要就是設置吸光度，點擊四次吸光度，設置為340、280、260、230。
1、進板後確定板類型和板孔
2、設置吸光度，點擊四次吸光度，分別設置為340、280、260、230。
3、開始

酶標儀即酶聯免疫檢測儀是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動2大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。 測定一般要求測試液的最終體積在250μL以下，用一般光電比色計無法完成測試，因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求。