1. 基因檢測的步驟是什麼
基因檢測口腔拭子採集,具體步驟:
1.基因檢測准備棉簽(單頭),伸進口腔,從口腔內側兩頰粘膜處(腮幫子內側)反復擦拭20次以上,取出采樣拭子棉簽,放在干凈白紙上陰干。
2.以同樣的方法採集5根拭子棉簽。陰涼乾燥後干凈的紙質信封內保存
3.請不要忘記對樣本做好標記。不要和其他人物質互相接觸。以免接觸其他dna, 上述方法採集的樣本,可以在乾燥環境下保存2-3個月。不管採集什麼樣本,鑒定結果的准確性是一樣的。因為樣本採集只是從中提取dna,而每個人的dna是終身不變的,所以即使採集不同的樣本,鑒定結果的准確性是一樣的。口腔拭子dna提取的方法口腔拭子dna提取可以用商業化的試劑盒,方便簡單易操作,用華晨陽的配套dna提取試劑盒,主要是針對口腔脫落細胞dna提取的。口腔拭子在哪裡買?
2. 基因檢測有哪些方法
基因檢測的方法不勝枚舉,基本的步驟是樣本的獲取(包括血液、唾液、組織樣本等)——處理(如DNA的提取與純化、文庫構建等)——序列測定——序列分析——結果解讀——報告撰寫。廣泛應用的核酸序列測定方法是直接測序法,目前最先進而且被廣泛使用的方法和儀器有第一代的Sanger測序法,第二代的高通量測序法(如美國Illumina公司的Hiseq測序儀和華大基因子公司CompleteGenomics開發的測序方法)等。目前也已出現被稱為第三代測序技術的方法,如單分子實時DNA測序法。
第一代:sanger測序
第一代的Sanger測序技術的優點是,測序讀長長,能達到800-1K bp,且測序用時短,只需要幾十分鍾即可完成一次測序,測序准確度高,目前仍是測序的金標准;缺點是通量低、成本高。
第二代:高通量測序(NGS)
第二代測序技術的優點是測序通量和效率高,成本低廉;缺點是測序讀長普遍較短,且用時較長。以目前應用最為廣泛的測序儀之一的illumina公司Hiseq2000測序儀為例,其一次測序的數據產出量可達500
Gb,但讀長為100 bp,且需要耗時14天左右。而Life technology公司的IonProton測序儀是邊合成邊通過反應體系電位的微小差別來測定鹼基序列。
第三代:單分子/納米孔測序
由於第二代技術存在短讀長和耗時長的缺陷,人們希望第三代測序技術能解決這些缺陷,所以第三代測序技術在長讀長和短耗時出發,目前尚未完全成熟,市場應用面還不算廣,而且各種測序儀之間差異較大,測序原理也是各出奇招。如Pacific Bioscience公司則是通過在PCR合成DNA的過程中,用顯微鏡檢測由熒光基團標記的dNTP反應後釋放出的熒光來測序。而一直未投產的牛津大學研發的測序儀,則是通過檢測由核酸外切酶剪切DNA時,「掉落」到檢測微孔的核苷酸來測序。
3. 目的基因的檢測與鑒定過程是什麼
目的基因的檢測是看看目的基因進入受體細胞沒,所以先利用基因探針檢查受體細胞中是否含有目的基因;其次需要考慮,受體細胞中有了目的基因後是否能順利轉錄,因此還是基因探針來檢查信使RNA;含有信使RNA後還得考慮是否能翻譯形成蛋白質,利用抗原-抗體雜交來檢測蛋白質。最後,考試中經常考察最後的一步,有了蛋白質後是否就有了滿意的性狀,即個體生物學水平上的檢測,例如,我國的抗蟲棉經過了多次基因改造後才得到我們滿意的性狀。
4. 目的基因的檢測
可以有很多種方法的~
可以像樓上所說的DNA雜交技術~
還可以用蛋白質檢驗~例如大腸桿菌的某種質粒具有青黴素抗性基因,當這種質粒成為重組質粒並被轉入受體細胞後,可根據受體細胞是否具有青黴素抗性來判斷受體細胞是否獲得目的基因
還可以運用RNA雜交技術檢驗~具體過程像DNA雜交技術~不過是換成RNA~
還可以用抗原-抗體技術檢驗~例如轉基因抗蟲稻米~想知道目的基因是否起作用~捉些蟲子進去~看看蟲子會不會吃~不會吃就說明目的基因成功導入了~
方法應該還有很多~我所學的就是這些~希望對你有用~
5. 目的基因的檢測的步驟及方法
我是高二學生,課本上說的是用標記基因的抗性進行測試(這是檢測目的基因是否導入受體細胞的方法) 用抗原抗體雜交技術的方法檢測目的基因是否在受體細胞表達. 不知道你問的是哪個?
6. 怎樣篩選目的基因
有4種方法:
1、從基因文庫中獲得目的基因.
方法:
第一步,通過PCR方法將目的基因已知的部分核苷酸序列擴增出來,進行放射性同位素標記(也可以用別的標記方法進行,如生物素、熒光素等),即用標記了放射性同位素的目的DNA片段作為探針,與擴增出來的DNA雜交.
第二步,將基因文庫中的所有菌落轉移至硝酸纖維膜上(也可以用其他類型的膜),然後,通過處理溶解消化掉細菌中的蛋白質,並使DNA固定在膜上.
第三步,按Southern雜交的方法進行雜交.
第四步,在X光底片上出現黑斑的菌落,這表明這個菌落中含有所需要的目的基因(若選用別的標記方法,有陽性信號的菌落則含有所需要的目的基因).
第五步,從該菌落中再提取目的基因.
2、PCR 篩選法方法:
第一步:將反應體系(包括雙鏈模板、引物、耐高溫的DNA聚合酶、四種脫氧核糖核苷酸以及酶促反應所需的離子等)加熱至90~95 ℃,使雙鏈DNA模板兩條鏈之間的氫鍵打開,變成單鏈DNA,作為互補鏈聚合反應的模板.
第二步:將反應體系降溫至55~60 ℃,使兩種引物分別與模板DNA鏈3′端的互補序列互補配對,這個過程稱為復性.
第三步:將反應體系升溫至70~75 ℃,在耐高溫的DNA聚合酶催化作用下,將與模板互補的單個核苷酸加到引物所提供的3-OH上,使DNA鏈延伸,產生一條與模板鏈互補的DNA鏈.
上述三步反應完成後,一個DNA分子就變成了兩個DNA分子,隨著重復次數的增多,DNA分子就以2n的形式增加.PCR的反應過程都是在PCR擴增儀中完成的.
3、核酸雜交法、
DNA和DNA分子之間的雜交.目的基因是否整合到受體生物的染色體DNA中,這在真核生物中是目的基因可否穩定存在和遺傳的關鍵.如何證明這一點,就需要通過Southern雜交技術.基本做法是:
第一步,將受體生物DNA提取出來,經過適當的酶切後,走瓊脂糖凝膠電泳,將不同大小的片段分開;
第二步,將凝膠上的DNA片段轉移到硝酸纖維素膜上;
第三步,用標記了放射性同位素(或生物素)的目的DNA片段作為探針與硝酸纖維素膜上的DNA進行雜交;
第四步,將X光底片壓在硝酸纖維素膜上,在暗處使底片感光;
第五步,將X光底片沖洗,如果在底片上出現黑色條帶,則表明受體植物染色體DNA上有目的基因.
4、免疫篩選法
Western雜交──蛋白質分子(抗原—抗體)之間的雜交.它是檢測目的基因是否表達出蛋白質的一種方法.具體做法是:
第一步,將目的基因在大腸桿菌中表達出蛋白質;
第二步,將表達出的蛋白質注射動物進行免疫,產生相應的抗體,並提取出抗體(一抗);
第三步,從轉基因生物中提取蛋白質,走凝膠電泳;
第四步,將凝膠中的蛋白轉移到硝酸纖維素膜上;
第五步,將抗體(一抗)與硝酸纖維素膜上的蛋白雜交,這時抗體(一抗)與目的基因表達的蛋白(抗原)會特異結合.由於這種抗原—抗體的結合顯示不出條帶,所以加入一種稱為二抗的抗體,它可以與一抗結合,二抗抗體上帶有特殊的標記.如果目的基因表達出了蛋白質,則結果為陽性.
7. 基因檢測是怎麼做的流程是什麼樣的
中源協和基因檢測采樣方法及流程(采樣方法有2種,下面分別描述)
(一)、口腔黏膜采樣檢測方法很多檢測單位採用口腔粘膜脫落細胞樣本採集方式,採集程序如下:口腔清潔:用清水漱口一到二次。采前准備:從盒內取出1號管(平底),輕甩一下上下搖動使生理鹽水全部沉積在管底。擰開蓋子將管立於桌上備用。刮取細胞:取出口腔粘膜刮勺,伸入口腔將刮勺的頭部帶齒部分貼在一側口腔內側的臉頰部位於上下牙齒之間的部位,稍用力(相當於刷牙的力氣)按前後方向在口腔粘膜上刮十餘次,再用刮勺頭部的另一側(勿須轉動刮勺)刮取另一側的口腔粘膜,刮取十餘次。收集細胞:將刮勺迅速浸入到1號管的生理鹽水中攪動,將粘膜細胞洗到水中。將刮勺提離水面,提留片刻並抖動刮勺使勺上的水全部滴入管中。此時可見生理鹽水溶液由清變濁。固定細胞:取出2號管,輕甩一下使溶液全部沉積在管底。將1號管中的溶液全部倒入2號管中,蓋上並擰緊2號管的螺旋蓋,上下用力搖10次。郵寄樣品:將2號管置入自封袋的紙袋中,並將自封袋封緊送交檢測。
(二)唾液采樣檢測方法目前出現較新的基因樣本採集方法——唾液采樣檢測法,此方法更加方便快捷,並且實現無創採集,檢測效果和提取口腔黏膜檢測效果一樣。基因樣本採集流程如下:1、口腔清潔:講解采樣流程及注意事項,要求客戶用清水漱口,半小時內不得進食、飲水、吸煙、飲酒或嚼口香糖等。2、采前准備:戴上一次性醫用手套(採用醫院標准戴法及程序),打開採集箱准備采樣。從包裝盒內取出采樣管,拔出塞蓋後,將采樣管插入到采樣漏斗中。4、採取唾液:通過采樣漏斗將唾液收集到采樣管中,直至采樣管上標簽所示位置。注意:要保證實際的唾液量能達到刻度線,上層的泡沫不包括在內,且必須在半小時內完成唾液采樣過程。5、保存樣品:從包裝盒內取出杯蓋,杯蓋內含有固定液,將杯蓋對准采樣漏斗順時針方向旋緊。確認杯蓋旋緊後,顛倒10次,使唾液和固定液充分混勻,保持杯蓋在上方,將采樣管垂直放置5分鍾。保持采樣管垂直,拔出采樣漏斗,用塞蓋蓋緊采樣管,上下顛倒混勻10次。注意:杯蓋內的固定液應該清亮、無色、透明,如有渾濁請拋棄。請不要用手撕開杯蓋內的塑料薄膜。6、郵寄樣品:丟棄采樣漏斗與采樣杯蓋,將采樣管與填妥的資料置入自封袋的紙袋中,並將自封袋封緊送交檢測。
中源協和基因檢測建議:利用基因檢測技術在疾病發生前就發現疾病發生的風險,提早預防、或採取有效的干預措施。
8. 基因檢測方法有哪些
基因是遺傳的基本單元,攜帶有遺傳信息的DNA或RNA序列,通過復制,把遺傳信息傳遞給下一代,指導蛋白質的合成來表達自己所攜帶的遺傳信息,從而控制生物個體的性狀表達。基因檢測是通過血液、其他體液、或細胞對DNA進行檢測的技術,是取被檢測者外周靜脈血或其他組織細胞,擴增其基因信息後,通過特定設備對被檢測者細胞中的DNA分子信息作檢測,分析它所含有的基因類型和基因缺陷及其表達功能是否正常的一種方法,從而使人們能了解自己的基因信息,明確病因或預知身體患某種疾病的風險。
基因檢測可以診斷疾病,也可以用於疾病風險的預測。疾病診斷是用基因檢測技術檢測引起遺傳性疾病的突變基因。應用最廣泛的基因檢測是新生兒遺傳性疾病的檢測、遺傳疾病的診斷和某些常見病的輔助診斷。
一般有三種基因檢測方法:生化檢測、染色體分析和DNA分析。
1.生化檢測
生化檢測是通過化學手段,檢測血液、尿液、羊水或羊膜細胞樣本,檢查相關蛋白質或物質是否存在,確定是否存在基因缺陷。用於診斷某種基因缺陷,這種缺陷是因某種維持身體正常功能的蛋白質不均衡導致的,通常是檢測測試蛋白質含量。還可用於診斷苯丙酮尿症等。
2.染色體分析
染色體分析直接檢測染色體數目及結構的異常,而不是檢查某條染色體上某個基因的突變或異常。通常用來診斷胎兒的異常。
常見的染色體異常是多一條染色體,檢測用的細胞來自血液樣本,若是胎兒,則通過羊膜穿刺或絨毛膜絨毛取樣獲得細胞。將之染色,讓染色體凸顯出來,然後用高倍顯微鏡觀察是否有異常。
3.DNA分析
DNA分析主要用於識別單個基因異常引發的遺傳性疾病,如亨廷頓病等。DNA分析的細胞來自血液或胎兒細胞。
基因檢測可以分為以下五類:
1.基因篩檢
主要是針對特定團體或全體人群進行檢測。大多數通過產前或新生兒的基因檢測以達到篩檢的目的。
2.生殖性基因檢測
在進行體外人工授精階段可運用,篩檢出胚胎是否帶有基因變異,避免胎兒患有遺傳性疾病。
3.診斷性檢測
多數用來協助臨床用葯指導。
4.基因攜帶檢測
基因攜帶者如果與某些特殊基因相結合,可能會導致下一代患基因疾病,通過基因攜帶者的檢測可篩檢出此種可能,作為基因攜帶者婚前檢查、生育時的參考。
5.症狀出現前的檢測
檢測目的是了解健康良好者是否帶有某種突變基因,而此基因與特定疾病的發生有密切的聯系。
臨床意義
1.用於疾病的診斷
如對結核桿菌感染的診斷,以前主要依靠痰、糞便或血液培養,整個檢驗流程需要在兩周以上,採用基因診斷的方法,不僅敏感性大大提高,而且在短時間內就能得到結果。
2.了解自身是否有家族性疾病的致病基因,預測患病風險
資料證實10%~15%的癌症與遺傳有關,糖尿病、心腦血管疾病等多種疾病都與遺傳因素有關。如具有癌症或多基因遺傳病(如老年痴呆、高血壓、糖尿病等)的人可找出致病的遺傳基因,就能夠有針對性地調整生活方式,預防或者延緩疾病的發生。
3.正確選擇葯物,避免濫用葯物和葯物不良反應
由於個體遺傳基因上的差異,不同的人對外來物質產生的反應也會有所不同,因此部分患者使用正常劑量的葯物時,可能會出現葯物過敏、紅腫發疹的現象。根據基因檢測的結果,可制定特定的治療方案,從而科學地指導使用葯物,避免葯物毒副反應。
9. 如何對目的基因進行檢測與鑒定
可以從三方面對目的基因進行鑒定:
1、直接測定:按照目的基因組成製作DNA分子探針進行配對。
2、mRNA測定:根據目的基因組得出其轉錄的mRNA組成,利用探針檢測。
3、蛋白測定:可應用PCR相應技術測定目的基因翻譯的相關蛋白,也可採用免疫化學法導入蛋白抗體檢測蛋白。
(9)目的基因檢測的方法和步驟擴展閱讀:
對目的基因進行鑒定和檢測的多種方法:
基因鑒定技術是一項生物學檢測技術,人體細胞有總數約為30億個鹼基對的DNA,每個人的DNA都不完全相同,人與人之間不同的鹼基對數目達幾百萬之多,因此通過分子生物學方法顯示的DNA圖譜也因人而異,由此可以識別不同的人。
所謂「DNA指紋」,就是把DNA作為像指紋那樣的獨特特徵來識別不同的人。由於DNA是遺傳物質,因此通過對DNA鑒定還可以判斷兩個人之間的親緣關系。
基因鑒定的原理其實是DNA分子雜交,這種分子雜交是在緩沖液中進行的,由於DNA分子雜交時,兩個分子相遇的機會不是很大,所以就需要眾多的帶有目的基因的DNA與待測的DNA分子。
而PCR技術就是將目的基因進行擴增的一種技術手段,所以在進行基因鑒定時並不是直接進行鑒定的,而是先進行PCR技術將目的基因擴增再進行鑒定。
網路-對目的基因進行檢測與鑒定
10. 高二生物中的目的基因的檢測與鑒定
目的基因的檢測與鑒定分分子水平檢測和個體水平鑒定。
個體水平鑒定簡單說就是把導入了目的基因的生物體培養出來,看生物個體中是否能表達出你所需要的性狀。
分子水平檢測就相當麻煩了,它有三個步驟。
首先,要檢測轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因。方法是採用DNA分子雜交技術,即將轉基因生物的基因組DNA提取出來,同時,在外面(像基因文庫中)取一段新的含有目的基因的DNA片段,用放射性同位素等作標記,以此來作為探針,將探針與基因組DNA雜交,來檢測。(實際上就是DNA復制的情況,DNA復制時,一條雙鏈的DNA分子解旋成了兩條單鏈的DNA,而探針也是一條雙鏈的DNA片段解旋成了兩條單鏈的DNA片段,因為探針上也有目的基因,基因組的DNA上也有目的基因,在重新形成新的2條DNA,也就是復制時,鹼基互補配對,則含目的基因的探針上的單鏈能與同樣含目的基因的基因組DNA單鏈配對,形成一條新的DNA雙鏈分子,一旦形成新的DNA分子後,放射性標記能在新的DNA分子中含目的基因處發出熒光,從而表明目的基因已導入。)
其次,就是大大你說的檢測目的基因是否轉錄出了mRNA,方法和上面一樣,但不同之處是,從轉基因生物中提取出的是mRNA,同樣,同時,在外面(像基因文庫中)取一段新的含有目的基因的DNA片段,用放射性同位素等作標記,以此來作為探針,將探針與mRNA雜交,來檢測。(這里實際上和DNA的轉錄翻譯有點像,畢竟mRNA是單鏈的,實際上是探針DNA解旋成兩條單鏈的DNA片段,就像轉錄一樣,這時的mRNA會與單鏈的DNA鹼基互補配對,顯現出標記的同位素熒光,表明mRNA上有目的基因。)所以說,mRNA與目的基因雜交,是和DNA雜交,不是mRNA與目的基因的轉錄出的mRNA雜交。
最後要檢驗的就是看目的基因能否翻譯成蛋白質,就不多說了。
不知道講的清不清楚,語文表達有限,希望你能理解啊。