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細胞測量的方法

發布時間:2022-01-09 07:33:34

㈠ 細胞活性檢測的方法有多少種 每種的原理是什麼

簡單說幾個把

  1. 染色體法 主要在培養基中利用死活細胞對燃料親和力不同 來判斷

  2. 克隆形成實驗 原理是單個細胞在體外增至六代後,後代形成的細胞群體 ,通過計算其克隆形成率 來判斷

  3. 比色法 也是比較經典的 M,RR 活體細胞中的線粒體中的琥珀酸脫氫酶可以將M,rr還原成藍紫色的結晶甲醋 死細胞無此功能

㈡ 測量細胞大小的方法有哪些

測量細胞大小的方法一般來說就是通過在顯微鏡下觀察它的大小或者是通過技術的方式,也就是在顯微鏡下看到細胞數目大小的情況。

㈢ 細胞免疫功能測定的常用方法

正確答案:A
解析:免疫系統功能分為體液免疫和細胞免疫
。體液免疫包括:補體、甘露聚糖結合素、急性期蛋白、干擾素、免疫球蛋白
。B、C、D、E均為體液免疫的測定
。細胞免疫包括:中性粒細胞、巨噬細胞、自然殺傷細胞、樹突細胞、T淋巴細胞、B淋巴細胞
。故選A

㈣ 顯微鏡下測量細胞長度時尺子應放在那裡怎樣測量(過程)

測微尺應放在目鏡之上,測量時讀出測微尺的讀數再除以放大倍數,即得到細胞的實際長度。

㈤ 怎樣檢測細胞的生長,存活及增殖

BrdU標記法
1.細胞以1.5×105/ml細胞數接種於直徑35ml培養皿中(內放置一蓋玻片),培養1天,用含0.4% FCS培養液同步化3天,使絕大多數細胞處於G0期。
2.終止細胞培養前,加入BrdU(終濃度為30μg/L),37℃,孵育40min。
3.棄培養液,玻片用PBS洗滌3次。
4.甲醇/醋酸固定10min。
5.經固定的玻片空氣乾燥,0.3%H2O2-甲醇30min滅活內源性氧化酶。
6.5%正常兔血清封閉。
7.甲醯胺100℃,5min變性核酸。
8.冰浴冷卻後PBS洗滌,加1抗即抗小鼠BrdU單抗(工作濃度1:50),陰性對照加PBS或血清。
9.按ABC法進行檢測,蘇木素或伊紅襯染,在顯微鏡下隨機計數10個高倍視野中細胞總數及BrdU陽性細胞數,計算標記指數(LI)。
結晶紫法
1.體外細胞培養結束後,去培養液,加入11%的戊二醛固定,置於振盪器上搖20min。
2.固定細胞用去離子水洗滌至戊二醛液洗凈。
3.置空氣或烘箱37℃徹底乾燥。
4.加入0.1%的結晶紫液對細胞染色,振搖30min。
5.用蒸餾水洗滌,至多餘的結晶紫液沖洗干凈。
6.置空氣或37℃烘箱中徹底乾燥。
7.加入10%的乙酸對細胞吸收的結晶紫進行提取。
8.1h後在酶標儀上測定光吸收度,波長595nm。
酸性磷酸酶法
1.96孔細胞培養板中培養細胞,去培養液。用0.01mol/L PBS洗滌1次(如為懸浮細胞則用離心洗滌)。
2.去洗滌液後加入磷酸酶底物100μl/孔。
3.37℃,孵育1~4h。
4.加入0.1mol/L氫氧化鈉10μl/孔。
5.在多孔酶標儀上405nm處測光吸收度,將細胞培養板其中不含細胞,同樣處理過的一孔作為空白對照,所測的每孔光吸收度可間接反應每孔中的細胞數。如在同樣條件下作一細胞數的系列標准對照,以細胞數為X軸,光吸收度為Y軸,可作直線回歸,可推算出每孔中的細胞。

㈥ 細胞大小的測量原理

首先微生物的生長分為四個時期,首先是適應期,然後是對數期,穩定期,衰亡期。
在對數期的
時候,細胞都處於生長分裂旺盛時期,所以其細胞大小處於較穩定的情況,而在穩定期的時候,細胞的生長和死亡處於相同的比例,所以不適宜用來測定大小。
對數生長期是指細胞在一定的環境下經過了短暫的適應期,進而快速生長的時期,此時期營養充足,細胞會以對數生長,假如原來只有一個細胞,進入對數期以後就會變為兩個,兩個再變為四個,四個變為八個...即以2的n次方的速度生長(n為細胞的分裂次數),在對數期生長速率遠遠大於死亡速率,所以在對數期最顯著地特徵就是細胞的數目大量增加,但當細胞經過一定時間的生長會消耗掉營養物質,產生大量的次生代謝產物使得ph值下降,其生長環境變得惡劣,此時生長速度下降,生長速率和死亡速率平衡,細胞的總個數基本保持不變,細胞的對數生長期結束進入平台期。

㈦ 細胞活力測定常用的簡便方法

MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)並沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞碸(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內,MTT結晶形成的量與細胞數成正比。該方法已廣泛用於一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤葯物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。
缺點:由於MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶於水,需被溶解後才能檢測。這不僅使工作量增加,也會對實驗結果的准確性產生影響,而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗者也有損害。
細胞活力常用百分比表示,活力的大小對試驗結果有很大影響。細胞活力的測定有許多方法,最簡便常用的方法是台盼藍(trypanblue)染色法。台盼藍又稱錐藍,是一種陰離子型染料,這種染料不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色,但死亡細胞的細胞膜通透性增加,可使染料通過細胞膜進入細胞內,使死細胞著色呈藍色。

㈧ 常用的測定微生物細胞量和細胞數的方法

直接計數法
液體稀釋法
平板菌落計數法
比濁法
乾重法

㈨ 檢測體細胞數有哪些方法

目前獲得世界各國普遍承認和使用的體細胞計數方法概括起來主要分為顯微鏡人工計數法和自動計數儀計數法。
1、顯微人工計數:體細胞計數的國際標准方法為顯微鏡鏡檢法,此法准確,大部分的快速檢測方法均用此法作校準,但在制備樣品、計數鏡檢時費時、費力,不適合作為現場快速和大樣品量時使用。
2、自動計數儀計數:目前,在乳品生產中牛乳體細胞計數主要是依靠大型的體細胞儀完成的,體細胞自動計數分析研究主要有以下兩個方面:
(1)流式細胞分析法.具代表性的產品為美國Bently計數儀,福斯Fossomatic 5000,荷蘭Delta體細胞計數儀等。該法檢測速度快,適合乳品集中檢測,但儀器成本高,不能夠保留樣本,且需要熟練人工操作,經常性校正監測等。
(2)另一方面是利用數字圖像分析系統,典型產品如韓國C-reader ADAM體細胞計數儀,該法數據准確,排除人為因素影響。由於該方法是基於標准鏡檢法的一種方法,所以其在韓國已經使用該種方法代替標准法對大型自動儀器進行校正。華誠睿光的牛博士Ⅱ和牛博士Ⅲ就是這種檢測方法的典型代表。

㈩ 細胞活性檢測的方法有多少種

細胞活性測定方法有台盼藍染色法、克隆(集落)形成法、 3H 放射性同位素摻入法、 MTT 法等。其中 MTT 法以其快速簡便,不需要特殊檢測儀器、無放射性同位素、適合大批量檢測的特點而得到廣泛的應用。但 MTT 法形成的 Formazan 為水不溶性的,需要加有機溶劑溶解,由於在去上清操作時會有可能帶走小部分的 Formazan ,故有時重復性略差。為了解決這個問題,研究人員又開發了很多種水溶性的四氮唑鹽類:如 XTT 、 CCK-8 ( WST-8 )等。

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